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摘要[目的] 探討6种消毒剂对养殖海水中细菌的杀灭效果。[方法] 使用不同浓度梯度的二溴海因、聚维酮碘、福尔马林、富氯、漂粉精和次氯酸钠等6种消毒剂对养殖海水进行处理,测定不同时间段细菌的杀灭率。[结果] 0.50~1.00 mg/L的二溴海因对细菌无明显的杀灭效果;0.50~1.00 mg/L的聚维酮碘对细菌在3和6 h的杀灭率为24.50%~44.30%,其他浓度的聚维酮碘对细菌的杀灭药效较二溴海因持久,说明聚维酮碘的杀菌效果强于二溴海因;仅5.00 mg/L的福尔马林在12 h的杀灭率略高于二溴海因,相同浓度的二溴海因对细菌的药效要强于福尔马林;漂粉精在12 h对细菌无杀灭效果;2.50 mg/L富氯在1 h对细菌的杀灭率为99.90%,说明富氯对细菌的药效强于漂粉精;各浓度的次氯酸钠对细菌的药效都强于富氯。仅5.00和10.00 mg/L聚维酮碘对细菌的杀灭效果低于相同浓度的二溴海因和福尔马林。[结论]6种消毒剂的杀菌效果依次为福尔马林<二溴海因<聚维酮碘<漂粉精<富氯<次氯酸钠,而其杀灭弧菌的效果依次为聚维酮碘<福尔马林<二溴海因<漂粉精<富氯<次氯酸钠,含氯消毒剂杀菌效果强于非含氯消毒剂。
关键词消毒剂;养殖海水;细菌;杀灭效果
中图分类号S949文献标识码A文章编号0517-6611(2015)16-152-03
Study on the Killing Effect of Six kinds of Disinfectants on Bacteria in Aquaculture Seawater
WANG Chenggui, LI Xuan, YANG Shiping, SUN Chengbo* et al
(College of Fisheries, Guangdong Ocean University, Zhanjiang, Guangdong 524088)
Abstract [Objective] The aim was to study the killing effect of six kinds of disinfectants on bacteria in aquaculture seawater. [Method] The auquculture seawater was disinfected with different concentration gradients of DBDMH, povidone iodine, formaldehyde, chlorine, calcium hypochlorite, sodium hypochlorite. The killing rate on bacteria was determined at different time. [Result] DBDMH at 0.50-1.00 mg/L had no obvious killing effects. The killing rate of povidone iodine at 0.50-1.00 mg/L on bacteria after 3 and 6 hours was 24.50%-44.30% and the killing efficiency of povidone iodine at other concentrations on bacteria was more permanent than that of DBDMH, which indicated that the bactericidal effects of povidone iodine were stronger than that of DBDMH. Only the killing rate of 5.00 mg/L formaldehyde after 12 h was slightly higher than that of DBDMH, the killing efficiency of DBDMH at the same concentration was stronger than that of formaldehyde. Calcium hypochlorite had no killing effect on bacteria after 12 h. The killing rate of 2.50 mg/L chlorine on bacteria after 1 h was 99.90%, which indicated that the killing efficiency of chlorine was stronger than that of calcium hypochlorite. The killing efficiency of sodium hypochlorite at different concentrations on bacteria was stronger than that of chlorine. Only the killing efficiency of povidone iodine at 5.00 and 10.00 mg/L on bacteria was worse than that of DBDMH and formaldehyde at the same concentrations. [Conclusion] The bactericidal effects of six kinds of disinfectants was formaldehyde < DBDMH < povidone iodine < calcium hypochlorite < chlorine < sodium hypochlorite. The killing effects of six kinds of disinfectants on vibrio was povidone iodine < formaldehyde < DBDMH < calcium hypochlorite < chlorine < sodium hypochlorite. The bactericidal effects of chlorinecontaining disinfectants were stronger than that of nonchlorine disinfectants. Key words Disinfectant;Aquaculture seawater;Bacteria;Killing effects
我国是海水养殖业发达的国家,养殖面积和产量均居世界第一,海水养殖为国民经济发展作出了重要贡献。2008年,我国水产品总产量为4 895.6万t,其中海水养殖产量1 340.3万t,占水产品总产量的27.4%[1]。海水养殖业在水产业中占有重要地位。2009 年世界水产养殖总产量为7.304 5×107 t,其中海水养殖产量3.920 7×107 t,占世界水产养殖总产量的53.68%[2]。近年来,随着环境污染和海区富营养化,细菌病害大量暴发[3-10],给海水养殖业造成巨大的经济损失,因受到各种病害的影响,2013年全球养殖对虾产量比2012年减少23%[11]。为了杀灭病菌和清除病源,在海水养殖业广泛使用消毒剂,如防治对虾发光病[12-13]、鱼类细菌性疾病。各种消毒剂对细菌的药效强度不同,杀灭效果明显不同。笔者分别使用不同浓度的二溴海因、聚维酮碘、福尔马林、富氯、漂粉精和次氯酸钠等6种常见消毒剂对养殖海水进行处理,研究6种消毒剂对养殖海水中细菌的杀灭效果,对指导生产有一定的实际意义。
1材料与方法
1.1试验时间、地点及试验用水
试验于2014年7月1日至8月30日在广东海洋大学东海岛海洋生物研究基地进行。试验用水为外海水,盐度26‰~28‰,pH 8.0~8.2,温度27~28 ℃,试验用桶为300 m3大小的玻璃钢桶。
1.2试验设计
用二溴海因、聚维酮碘、福尔马林、富氯、漂粉精和次氯酸钠6种常见的消毒剂分别按不同的浓度分批次处理试验海水,每个浓度设置3个平行组。其中3种含氯消毒剂的使用浓度按有效氯计算,有效氯的测定采用蓝墨水滴定法[14]。二溴海因和聚维酮碘试验使用浓度分别为0.50、1.00、3.00、5.00、10.00 mg/L;福尔马林试验使用浓度为3.00、5.00、10.00、20.00、50.00 mg/L;富氯试验使用浓度为0.125、0.25、0.75、1.25、2.50 mg/L;漂粉精试验使用浓度为0.50、1.50、2.50、50、10.00 mg/L;次氯酸钠试验使用浓度为1.00、3.00、5.00、10.00 mg/L;前3种消毒剂的试验时间梯度分别为3、6和12 h,富氯的试验时间梯度分别为1、3和6 h,漂粉精和次氯酸钠的试验时间梯度为1、6和12 h。
1.3细菌数量的测定
测定试验海水中异养细菌总数和弧菌总数。细菌总数的测定利用常规稀释培养法,弧菌总数的测定采用选择性培养法,异养细菌和弧菌分别用2216E、TCBS培养基培养,仪器用广东省医疗器械厂生产的生化培养箱[5-6],24 h后计算菌落数量。
2结果与分析
2.1二溴海因对细菌的杀灭效果
由表1可知,二溴海因浓度在0.50和1.00 mg/L范围时不能杀灭细菌,对细菌的杀灭率为0;当二溴海因浓度为3.00 mg/L时,3 h后对细菌有49.30%的杀灭效果,然后下降,12 h后无杀灭效果;当二溴海因浓度为5.00和10.00 mg/L时,对细菌有杀灭效果,6 h药效最强,最高可杀灭70.10%的细菌,12 h有反弹现象,杀灭率下降。用药浓度在0.50、1.00和3.00 mg/L范围时能有效杀灭弧菌,6 h药效最强,达到100%,12 h有轻微反弹;当二溴海因浓度5.00 mg/L时,3、6 h药效较强,对弧菌的杀灭率达100%,12 h有轻微反弹;当二溴海因浓度10.00 mg/L时,3~12 h对弧菌的杀灭率达100%。
表1不同浓度二溴海因对细菌的杀灭效果
二溴海因浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)7.2012.30
0.5038.4502.9076.40
616.4000100
1227.6000.2098.40
1.0038.3000.7094.30
611.9500100.00
1240.0000.2098.40
3.0033.6549.300.1598.80
66.657.640100
1210.3000.5095.90
5.0033.6549.300100
62.6663.100100
125.1029.20099.20
10.0033.5051.400100
62.1570.100100
125.8019.400100
2.2聚维酮碘对细菌的杀灭效果
由表2可知,当聚维酮碘浓度在0.50和1.00 mg/L时,聚维酮碘对细菌的杀灭率3、6 h内最高为44.30%,12 h无杀灭效果;当聚维酮碘浓度为3.00、5.00和10.00 mg/L时,聚维酮碘对细菌的杀灭率在3~6 h内最高为68.20%,3 h药效最强,6、12 h有反弹现象,杀灭率下降。当聚维酮碘浓度为0.50 mg/L时,聚维酮碘对弧菌无杀灭效果;当聚维酮碘浓度为1.00 mg/L时,3、6 h无杀灭效果,12 h杀灭率为11.10%;當聚维酮碘浓度为3.00和5.00 mg/L时,12 h药效最佳,最高杀灭率为44.40%;当聚维酮碘浓度为10.00 mg/L时,6 h药效最佳,杀灭率为52.80%;12 h杀灭率下降,为44.40%。
2.3福尔马林对细菌的杀灭效果 由表3可知,當福尔马林浓度在3.00和10.00 mg/L时,福尔马林对细菌的杀灭效果随用药时间的延长而增强,杀灭率在12 h时最大,为40.40%;当福尔马林浓度为20.00和10.00 mg/L时,3 h药效最强,随后下降。用药浓度在3.00、5.00、10.00和20.00 mg/L时,福尔马林对弧菌的药效在6 h最强,最大达100%,12 h有轻微反弹;当福尔马林浓度为50.00 mg/L时,3 h杀灭率达100%,至12 h没反弹。
表2不同浓度聚维酮碘对细菌的杀灭效果
聚维酮碘浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)1.591.80
0.5031.1130.201.800
61.2024.502.200
122.470.004.350
1.0030.8944.301.850
61.1726.702.260
121.6801.6011.10
3.0030.7354.103.350
61.1726.701.705.56
121.2521.701.4022.20
5.0030.6758.202.250
60.8347.801.3027.80
121.2024.501.0044.40
10.0030.5168.201.5016.70
60.8248.300.8552.80
120.9639.901.0044.40
表3不同浓度福尔马林对细菌的杀灭效果
福尔马林浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)1.7616.00
3.0031.731.4211.7026.90
61.5412.505.3066.90
121.1833.005.8063.75
5.0031.656.2711.6027.50
61.5313.100.6096.30
121.1733.605.7064.40
10.0031.5412.308.0549.70
61.1534.300.1099.40
121.0540.400.1599.10
20.0030.2883.904.3572.80
60.7557.300100
1227.5000.1099.40
50.0030.0895.200100
60.2586.000100
128.1000100
2.4富氯对细菌的杀灭效果
由表4可知,当富氯浓度在0.125 mg/L时,富氯对细菌的杀灭效果在3 h时最佳,6 h反弹明显,无效果;当富氯浓度为0.25和0.75 mg/L时,1 h药效最佳,随后下降,在6 h无效果,杀灭率为0;当富氯浓度1.25和2.50 mg/L时,1 h时药效最佳,随后下降,在6 h下降更为明显。当富氯浓度为0.125和0.25 mg/L时,富氯对弧菌的药效在3 h时最佳,杀灭率最高(91.60%);当富氯浓度为0.75、1.25和2.50 mg/L时,1 h、3 h的杀灭率均为100%,6 h反弹明显,杀灭率下降。
2.5漂粉精对细菌的杀灭效果
由表5可知,各浓度的漂粉精对细菌的药效在1 h时最佳,杀灭率最高(99.90%),6 h下降,12 h明显反弹,杀灭率均为0。各浓度的漂粉精对弧菌的药效在1 h最佳,当漂粉精浓度在2.5 mg/L及以上1 h时可达100%,6 h轻微下降,12 h下降明显。
表4不同浓度富氯对细菌的杀灭效果
富氯浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)1.8111.30
0.12511.5911.9013.000
31.3624.903.1072.60
62.5704.5559.70
0.2510.9547.404.1063.70
30.9945.200.9591.60
65.4505.4052.20
0.7515.0572.000100
30.9050.100100
67.9001.1589.80
1.251099.800100
30.0994.900100
61.0840.200.9092.00
2.501099.900100
30.0497.600100
60.3878.900.0599.60
表5不同浓度漂粉精对细菌的杀灭效果
漂粉精浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)7.8019.70
0.5011.3383.000.2598.70
64.3044.901.2093.90
1266.00035.000
1.5010.3595.500.0599.70 64.4043.600.9595.20
12127.0009.0054.30
2.5010.1098.700100
61.0586.500.0599.70
1221.7007.3062.90
5.0010.0199.900100
60.1797.900.4098.00
1247.0004.7076.10
10.0010.0199.900100
60.1198.600100
127.8004.0079.70
2.6次氯酸钠对细菌的杀灭效果
由表6可知,次氯酸钠浓度为1.00 mg/L时,次氯酸钠对细菌的药效在6 h时最强,杀灭率为49.10%;当次氯酸钠浓度为3.00和5.00 mg/L时,次氯酸钠对细菌的药效在1 h时最强,杀灭率最大为99.70%,在12 h时最差;当次氯酸钠浓度为10.00 mg/L时,6 h药效最强,杀灭率为99.90%。当次氯酸钠浓度在1.00、3.00和5.00 mg/L时,在1 h时药效最强,都为100%,此后下降;当次氯酸钠浓度为10.00 mg/L时,1~12 h杀灭率为100%,没有反弹现象。
3讨论
0.50~1.00 mg/L二溴海因对细菌无明显的杀灭效果,杀灭率为0;0.50~1.00 mg/L的聚维酮碘对细菌在3、6 h的
表6不同浓度次氯酸钠对细菌的杀灭效果
次氯酸钠浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)2.872.00
1.0011.9631.700100
61.4649.101.5025.00
121.6642.202.650
3.0010.3488.200100
61.1460.501.4030.00
121.6343.200.5075.00
5.0010.0199.700100
60.1694.500100
121.5844.900.1095.00
10.0010.0199.800100
6099.900100
12099.900100
杀灭率最低为24.50%,最高为44.30%,有部分杀灭效果,其他浓度组的聚维酮碘对细菌的杀灭药效较二溴海因持久,聚
维酮碘的杀菌效果强于二溴海因;5.00和10.00 mg/L的福爾马林在3个时间段中仅5.00 mg/L浓度在12 h的杀灭率略高于二溴海因,其他5个时间段均低于二溴海因,相同浓度的二溴海因对细菌的药效要强于福尔马林;富氯的主要成分为三氯异氰尿酸钠,漂粉精的主要成分为次氯酸钙,漂粉精在12 h时对细菌杀灭无效果,其他浓度在12 h亦无明显药效,2.50 mg/L富氯在1 h时对细菌的杀灭率为99.90%,高于漂粉精,说明富氯对细菌的药效强于漂粉精;次氯酸钠在各浓度组对细菌的药效强于富氯。对弧菌的杀灭效果分析发现,仅5.00和10.00 mg/L聚维酮碘的效果低于相同浓度的二溴海因和福尔马林,其他消毒剂对弧菌的杀灭效果与对细菌的杀灭效果强度次序相同。综合分析,6种消毒剂杀灭细菌的效果依次为福尔马林<二溴海因<聚维酮碘<漂粉精<富氯<次氯酸钠,杀灭弧菌的效果依次为聚维酮碘<福尔马林<二溴海因<漂粉精<富氯<次氯酸钠,含氯消毒剂杀菌效果强于非含氯消毒剂。
海水养殖对细菌病的预防是关键的环节,定期消毒是主要措施,消毒剂的使用在杀灭病害细菌的同时,亦带来各种影响。氯溴等卤素与水中的碳氢有机化合物形成三卤甲烷等多种卤代有机物,对人体和饲养动物具致癌、致突变诱发作用[15]。目前,各消毒剂所存在的最主要问题是毒性和残留对水产动物、人类以及环境的损害,不符合健康养殖规范要求。如果消毒剂克服了以上弊端,在水产动物的病害防治上仍有着广阔的前景。采用其他方式替代消毒剂预防细菌性疾病,水产用无公害制剂开发和使用不妨为一种有效方法。目前运用较多的是各种微生态制剂的使用,如在海水养殖池塘投放光合细菌、芽孢类等微生微制剂,形成一定的优势有益种群,以抑制各类有害病菌的生长繁殖[16-17]。
安徽农业科学2015年
参考文献
[1] 陈雨生,房瑞景,乔娟,等.中国海水养殖业发展研究[J].农业经济问题,2012(6):72-77.
关键词消毒剂;养殖海水;细菌;杀灭效果
中图分类号S949文献标识码A文章编号0517-6611(2015)16-152-03
Study on the Killing Effect of Six kinds of Disinfectants on Bacteria in Aquaculture Seawater
WANG Chenggui, LI Xuan, YANG Shiping, SUN Chengbo* et al
(College of Fisheries, Guangdong Ocean University, Zhanjiang, Guangdong 524088)
Abstract [Objective] The aim was to study the killing effect of six kinds of disinfectants on bacteria in aquaculture seawater. [Method] The auquculture seawater was disinfected with different concentration gradients of DBDMH, povidone iodine, formaldehyde, chlorine, calcium hypochlorite, sodium hypochlorite. The killing rate on bacteria was determined at different time. [Result] DBDMH at 0.50-1.00 mg/L had no obvious killing effects. The killing rate of povidone iodine at 0.50-1.00 mg/L on bacteria after 3 and 6 hours was 24.50%-44.30% and the killing efficiency of povidone iodine at other concentrations on bacteria was more permanent than that of DBDMH, which indicated that the bactericidal effects of povidone iodine were stronger than that of DBDMH. Only the killing rate of 5.00 mg/L formaldehyde after 12 h was slightly higher than that of DBDMH, the killing efficiency of DBDMH at the same concentration was stronger than that of formaldehyde. Calcium hypochlorite had no killing effect on bacteria after 12 h. The killing rate of 2.50 mg/L chlorine on bacteria after 1 h was 99.90%, which indicated that the killing efficiency of chlorine was stronger than that of calcium hypochlorite. The killing efficiency of sodium hypochlorite at different concentrations on bacteria was stronger than that of chlorine. Only the killing efficiency of povidone iodine at 5.00 and 10.00 mg/L on bacteria was worse than that of DBDMH and formaldehyde at the same concentrations. [Conclusion] The bactericidal effects of six kinds of disinfectants was formaldehyde < DBDMH < povidone iodine < calcium hypochlorite < chlorine < sodium hypochlorite. The killing effects of six kinds of disinfectants on vibrio was povidone iodine < formaldehyde < DBDMH < calcium hypochlorite < chlorine < sodium hypochlorite. The bactericidal effects of chlorinecontaining disinfectants were stronger than that of nonchlorine disinfectants. Key words Disinfectant;Aquaculture seawater;Bacteria;Killing effects
我国是海水养殖业发达的国家,养殖面积和产量均居世界第一,海水养殖为国民经济发展作出了重要贡献。2008年,我国水产品总产量为4 895.6万t,其中海水养殖产量1 340.3万t,占水产品总产量的27.4%[1]。海水养殖业在水产业中占有重要地位。2009 年世界水产养殖总产量为7.304 5×107 t,其中海水养殖产量3.920 7×107 t,占世界水产养殖总产量的53.68%[2]。近年来,随着环境污染和海区富营养化,细菌病害大量暴发[3-10],给海水养殖业造成巨大的经济损失,因受到各种病害的影响,2013年全球养殖对虾产量比2012年减少23%[11]。为了杀灭病菌和清除病源,在海水养殖业广泛使用消毒剂,如防治对虾发光病[12-13]、鱼类细菌性疾病。各种消毒剂对细菌的药效强度不同,杀灭效果明显不同。笔者分别使用不同浓度的二溴海因、聚维酮碘、福尔马林、富氯、漂粉精和次氯酸钠等6种常见消毒剂对养殖海水进行处理,研究6种消毒剂对养殖海水中细菌的杀灭效果,对指导生产有一定的实际意义。
1材料与方法
1.1试验时间、地点及试验用水
试验于2014年7月1日至8月30日在广东海洋大学东海岛海洋生物研究基地进行。试验用水为外海水,盐度26‰~28‰,pH 8.0~8.2,温度27~28 ℃,试验用桶为300 m3大小的玻璃钢桶。
1.2试验设计
用二溴海因、聚维酮碘、福尔马林、富氯、漂粉精和次氯酸钠6种常见的消毒剂分别按不同的浓度分批次处理试验海水,每个浓度设置3个平行组。其中3种含氯消毒剂的使用浓度按有效氯计算,有效氯的测定采用蓝墨水滴定法[14]。二溴海因和聚维酮碘试验使用浓度分别为0.50、1.00、3.00、5.00、10.00 mg/L;福尔马林试验使用浓度为3.00、5.00、10.00、20.00、50.00 mg/L;富氯试验使用浓度为0.125、0.25、0.75、1.25、2.50 mg/L;漂粉精试验使用浓度为0.50、1.50、2.50、50、10.00 mg/L;次氯酸钠试验使用浓度为1.00、3.00、5.00、10.00 mg/L;前3种消毒剂的试验时间梯度分别为3、6和12 h,富氯的试验时间梯度分别为1、3和6 h,漂粉精和次氯酸钠的试验时间梯度为1、6和12 h。
1.3细菌数量的测定
测定试验海水中异养细菌总数和弧菌总数。细菌总数的测定利用常规稀释培养法,弧菌总数的测定采用选择性培养法,异养细菌和弧菌分别用2216E、TCBS培养基培养,仪器用广东省医疗器械厂生产的生化培养箱[5-6],24 h后计算菌落数量。
2结果与分析
2.1二溴海因对细菌的杀灭效果
由表1可知,二溴海因浓度在0.50和1.00 mg/L范围时不能杀灭细菌,对细菌的杀灭率为0;当二溴海因浓度为3.00 mg/L时,3 h后对细菌有49.30%的杀灭效果,然后下降,12 h后无杀灭效果;当二溴海因浓度为5.00和10.00 mg/L时,对细菌有杀灭效果,6 h药效最强,最高可杀灭70.10%的细菌,12 h有反弹现象,杀灭率下降。用药浓度在0.50、1.00和3.00 mg/L范围时能有效杀灭弧菌,6 h药效最强,达到100%,12 h有轻微反弹;当二溴海因浓度5.00 mg/L时,3、6 h药效较强,对弧菌的杀灭率达100%,12 h有轻微反弹;当二溴海因浓度10.00 mg/L时,3~12 h对弧菌的杀灭率达100%。
表1不同浓度二溴海因对细菌的杀灭效果
二溴海因浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)7.2012.30
0.5038.4502.9076.40
616.4000100
1227.6000.2098.40
1.0038.3000.7094.30
611.9500100.00
1240.0000.2098.40
3.0033.6549.300.1598.80
66.657.640100
1210.3000.5095.90
5.0033.6549.300100
62.6663.100100
125.1029.20099.20
10.0033.5051.400100
62.1570.100100
125.8019.400100
2.2聚维酮碘对细菌的杀灭效果
由表2可知,当聚维酮碘浓度在0.50和1.00 mg/L时,聚维酮碘对细菌的杀灭率3、6 h内最高为44.30%,12 h无杀灭效果;当聚维酮碘浓度为3.00、5.00和10.00 mg/L时,聚维酮碘对细菌的杀灭率在3~6 h内最高为68.20%,3 h药效最强,6、12 h有反弹现象,杀灭率下降。当聚维酮碘浓度为0.50 mg/L时,聚维酮碘对弧菌无杀灭效果;当聚维酮碘浓度为1.00 mg/L时,3、6 h无杀灭效果,12 h杀灭率为11.10%;當聚维酮碘浓度为3.00和5.00 mg/L时,12 h药效最佳,最高杀灭率为44.40%;当聚维酮碘浓度为10.00 mg/L时,6 h药效最佳,杀灭率为52.80%;12 h杀灭率下降,为44.40%。
2.3福尔马林对细菌的杀灭效果 由表3可知,當福尔马林浓度在3.00和10.00 mg/L时,福尔马林对细菌的杀灭效果随用药时间的延长而增强,杀灭率在12 h时最大,为40.40%;当福尔马林浓度为20.00和10.00 mg/L时,3 h药效最强,随后下降。用药浓度在3.00、5.00、10.00和20.00 mg/L时,福尔马林对弧菌的药效在6 h最强,最大达100%,12 h有轻微反弹;当福尔马林浓度为50.00 mg/L时,3 h杀灭率达100%,至12 h没反弹。
表2不同浓度聚维酮碘对细菌的杀灭效果
聚维酮碘浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)1.591.80
0.5031.1130.201.800
61.2024.502.200
122.470.004.350
1.0030.8944.301.850
61.1726.702.260
121.6801.6011.10
3.0030.7354.103.350
61.1726.701.705.56
121.2521.701.4022.20
5.0030.6758.202.250
60.8347.801.3027.80
121.2024.501.0044.40
10.0030.5168.201.5016.70
60.8248.300.8552.80
120.9639.901.0044.40
表3不同浓度福尔马林对细菌的杀灭效果
福尔马林浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)1.7616.00
3.0031.731.4211.7026.90
61.5412.505.3066.90
121.1833.005.8063.75
5.0031.656.2711.6027.50
61.5313.100.6096.30
121.1733.605.7064.40
10.0031.5412.308.0549.70
61.1534.300.1099.40
121.0540.400.1599.10
20.0030.2883.904.3572.80
60.7557.300100
1227.5000.1099.40
50.0030.0895.200100
60.2586.000100
128.1000100
2.4富氯对细菌的杀灭效果
由表4可知,当富氯浓度在0.125 mg/L时,富氯对细菌的杀灭效果在3 h时最佳,6 h反弹明显,无效果;当富氯浓度为0.25和0.75 mg/L时,1 h药效最佳,随后下降,在6 h无效果,杀灭率为0;当富氯浓度1.25和2.50 mg/L时,1 h时药效最佳,随后下降,在6 h下降更为明显。当富氯浓度为0.125和0.25 mg/L时,富氯对弧菌的药效在3 h时最佳,杀灭率最高(91.60%);当富氯浓度为0.75、1.25和2.50 mg/L时,1 h、3 h的杀灭率均为100%,6 h反弹明显,杀灭率下降。
2.5漂粉精对细菌的杀灭效果
由表5可知,各浓度的漂粉精对细菌的药效在1 h时最佳,杀灭率最高(99.90%),6 h下降,12 h明显反弹,杀灭率均为0。各浓度的漂粉精对弧菌的药效在1 h最佳,当漂粉精浓度在2.5 mg/L及以上1 h时可达100%,6 h轻微下降,12 h下降明显。
表4不同浓度富氯对细菌的杀灭效果
富氯浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)1.8111.30
0.12511.5911.9013.000
31.3624.903.1072.60
62.5704.5559.70
0.2510.9547.404.1063.70
30.9945.200.9591.60
65.4505.4052.20
0.7515.0572.000100
30.9050.100100
67.9001.1589.80
1.251099.800100
30.0994.900100
61.0840.200.9092.00
2.501099.900100
30.0497.600100
60.3878.900.0599.60
表5不同浓度漂粉精对细菌的杀灭效果
漂粉精浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)7.8019.70
0.5011.3383.000.2598.70
64.3044.901.2093.90
1266.00035.000
1.5010.3595.500.0599.70 64.4043.600.9595.20
12127.0009.0054.30
2.5010.1098.700100
61.0586.500.0599.70
1221.7007.3062.90
5.0010.0199.900100
60.1797.900.4098.00
1247.0004.7076.10
10.0010.0199.900100
60.1198.600100
127.8004.0079.70
2.6次氯酸钠对细菌的杀灭效果
由表6可知,次氯酸钠浓度为1.00 mg/L时,次氯酸钠对细菌的药效在6 h时最强,杀灭率为49.10%;当次氯酸钠浓度为3.00和5.00 mg/L时,次氯酸钠对细菌的药效在1 h时最强,杀灭率最大为99.70%,在12 h时最差;当次氯酸钠浓度为10.00 mg/L时,6 h药效最强,杀灭率为99.90%。当次氯酸钠浓度在1.00、3.00和5.00 mg/L时,在1 h时药效最强,都为100%,此后下降;当次氯酸钠浓度为10.00 mg/L时,1~12 h杀灭率为100%,没有反弹现象。
3讨论
0.50~1.00 mg/L二溴海因对细菌无明显的杀灭效果,杀灭率为0;0.50~1.00 mg/L的聚维酮碘对细菌在3、6 h的
表6不同浓度次氯酸钠对细菌的杀灭效果
次氯酸钠浓度mg/L时间h
细菌数量×103ind/L杀灭率%
弧菌数量×103ind/L杀灭率%
0(CK)2.872.00
1.0011.9631.700100
61.4649.101.5025.00
121.6642.202.650
3.0010.3488.200100
61.1460.501.4030.00
121.6343.200.5075.00
5.0010.0199.700100
60.1694.500100
121.5844.900.1095.00
10.0010.0199.800100
6099.900100
12099.900100
杀灭率最低为24.50%,最高为44.30%,有部分杀灭效果,其他浓度组的聚维酮碘对细菌的杀灭药效较二溴海因持久,聚
维酮碘的杀菌效果强于二溴海因;5.00和10.00 mg/L的福爾马林在3个时间段中仅5.00 mg/L浓度在12 h的杀灭率略高于二溴海因,其他5个时间段均低于二溴海因,相同浓度的二溴海因对细菌的药效要强于福尔马林;富氯的主要成分为三氯异氰尿酸钠,漂粉精的主要成分为次氯酸钙,漂粉精在12 h时对细菌杀灭无效果,其他浓度在12 h亦无明显药效,2.50 mg/L富氯在1 h时对细菌的杀灭率为99.90%,高于漂粉精,说明富氯对细菌的药效强于漂粉精;次氯酸钠在各浓度组对细菌的药效强于富氯。对弧菌的杀灭效果分析发现,仅5.00和10.00 mg/L聚维酮碘的效果低于相同浓度的二溴海因和福尔马林,其他消毒剂对弧菌的杀灭效果与对细菌的杀灭效果强度次序相同。综合分析,6种消毒剂杀灭细菌的效果依次为福尔马林<二溴海因<聚维酮碘<漂粉精<富氯<次氯酸钠,杀灭弧菌的效果依次为聚维酮碘<福尔马林<二溴海因<漂粉精<富氯<次氯酸钠,含氯消毒剂杀菌效果强于非含氯消毒剂。
海水养殖对细菌病的预防是关键的环节,定期消毒是主要措施,消毒剂的使用在杀灭病害细菌的同时,亦带来各种影响。氯溴等卤素与水中的碳氢有机化合物形成三卤甲烷等多种卤代有机物,对人体和饲养动物具致癌、致突变诱发作用[15]。目前,各消毒剂所存在的最主要问题是毒性和残留对水产动物、人类以及环境的损害,不符合健康养殖规范要求。如果消毒剂克服了以上弊端,在水产动物的病害防治上仍有着广阔的前景。采用其他方式替代消毒剂预防细菌性疾病,水产用无公害制剂开发和使用不妨为一种有效方法。目前运用较多的是各种微生态制剂的使用,如在海水养殖池塘投放光合细菌、芽孢类等微生微制剂,形成一定的优势有益种群,以抑制各类有害病菌的生长繁殖[16-17]。
安徽农业科学2015年
参考文献
[1] 陈雨生,房瑞景,乔娟,等.中国海水养殖业发展研究[J].农业经济问题,2012(6):72-77.