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摘要[目的]了解云南省楚雄州猪衣原体病的流行情况。[方法] 从楚雄州部分规模化猪场及散养户采集1257份猪血清,采用间接血凝试验进行猪衣原体感染的血清流行病学调查。[结果]共检出阳性样品232份,阳性率为18.4%。在规模猪场的956份样品中,阳性样品193份,阳性率为20.2%;在母猪样品132份,阳性样品38份,阳性率为28.8%;在育肥猪血清824份中,阳性样品155份,阳性率为18.8%。在散养户301份样品中,阳性样品39份,阳性率为13%;母猪样品53份,共检出11份阳性样品,阳性率20.8%;育肥猪248份中,阳性样品28份,阳性率11.3%。[结论]猪衣原体病在云南省楚雄州呈一定的流行趋势。
关键词猪衣原体病;血清流行病学调查;间接血凝试验
中图分类号S858.28文献标识码A文章编号0517-6611(2015)16-155-02
Serological Survey of Porcine Chlamydiae Infection in Parts of Chuxiong Prefecture in Yunnan Province
SU Yunshun1,ZHU Lingyun2,LIU Pingdan2 et al
(1. Animal Husbandry and Veterinary Station in Guantun Township, Yao’an County of Chuxiong Prefecture in Yunnan Province, Chuxiong,Yunnan 675305; 2. College of Animal Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201)
Abstract [Objective] The research aimed to understand the prevalence of the porcine choamydiae infection in Chuxiong Prefecture of Yunnan Province.[Method] 1257 serum samples were collected from some largescale pig farms and scatterfed farms in Chuxiong Prefecture. The serological survey on porcine choamydiae infection was made by indirect hemagglutination (IHA)test.[Result] 232 positive samples were detected, and the total positive rate was 19.4%. Among 956 serum samples from largescale pig farms, 193 positive samples were detected and the positive rate was 20.2%. Among 132 serum samples from sows,38 samples were positive and the positive rate was 28.8%. Among 824 serum samples of finishing pigs, 155 samples were positive and the positive rate was 18.8%. Among 301 serum samples from scatterfed farms, 39 samples were positive and the positive rate was 13%. Among 53 serum samples of sows in scatterfed farms, 11 samples of sows were positive and the positive rate was 20.8%. Among 248 serum samples of finishing pigs, 28 samples were positive and the positive rate was 11.3%. [Conclusion] Swine choamydiae disease appeared a low epidemic trend in Chuxiong Prefecture of Yunnan Province.
Key words Porcine choamydiae; Serological invetigation;IHA
豬衣原体病是指由鹦鹉热衣原体引起的一类接触性自然疫源性人兽共患病,可引起多种动物和人发生多种疾病[1]。猪衣原体病可通过公猪精液传播,引起母猪流产或繁殖障碍[1-2]。猪衣原体病主要引起人或家畜流产综合征、肺炎、胸膜炎、心包炎、肠炎、关节炎、角膜炎以及睾丸炎、子宫炎、尿道炎等症状,人类的衣原体病以发热、头痛、沙眼结膜炎、肺炎和尿道炎为特征,且与动脉粥样硬化和冠心病有关[3]。该病常因菌株毒力以及猪的性别、年龄、生理状况和环境因素而表现出不同的症候群[2],在通常条件下衣原体隐性感染猪往往不表现出临床症状,但从其实质器官和分泌物、排泄物中可分离到病原,而临床表现型猪则表现出精神抑郁、懒于走动、体温升高、食欲减退或厥食,有时呼吸急促,偶有咳嗽,关节肿大、步态僵硬或发生跛行;眼结膜潮红,并呈水肿状,不断排出分泌物,怀孕母猪可发生流产、死胎或产下弱仔猪,有的母猪则由于木乃伊胎儿与胎衣粘连在一起,造成胎衣不下和不育症,哺乳仔猪多于产后2周左右表现为精神沉郁,步态不稳,寒颤,体温40.5~41.0 ℃,有的有神经症状,角弓反张,四肢呈游泳状,多发性关节炎,尤以前肢多见,咳嗽,气喘,跛行,关节肿大,抗生素治疗后症状缓解,但常易复发。有的可复发3~4次,形成僵猪,断奶后逐渐死亡,有的发病后很快死亡[4-5]。国际兽疫局将其列为二类传染病。该病在世界各地普遍存在,可造成很大危害和经济损失。猪衣原体病在临床症状上表现易与猪乙型脑炎、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、呼吸与繁殖综台征等多种疾病相似,常造成误诊,因此此次血清学调查可为楚雄地区防治猪衣原体病提供新依据。 1材料与方法
1.1材料
1.1.1研究对象。血清样本共1 257份,采集自楚雄州37个规模养猪场、126户农户。其中,规模猪场956份血清,农户散养猪血清301份。将采集于部分规模猪场不同年龄不同种用的血样,使用一次性促凝血真空采血管采血,在37 ℃恒温箱放置1 h再转入4 ℃冰箱中,放置1 ,h待血清自然析出后小心取出,置入一次性1.5 ml离心管中并保存备用。
1.1.2主要试剂。猪衣原体病IHA抗原及稀释液(批号为090810),购自中国农业科学院兰州兽医研究所。
1.1.3主要仪器。恒温水浴锅、4 ℃冰箱、-20 ℃冰箱、微量移液枪 、微型振荡器、37 ℃恒温箱
1.2方法
1.2.1正向间接血凝试验。将稀释液滴于96孔反应板中,每孔50 μl。取被检血清50 μl加入第1孔中,与稀释液混匀后吸50 μ1于第2孔,依次倍比稀释到1∶4 096,每孔加入25 μl抗原。设置阳性血清+抗原、阴性血清+抗原、稀释液+抗原作为对照。将反应板放在微型振荡器上振荡5~10 s,室温静置2 h后判定结果。
1.2.2结果判定。在对照试验成立的前提下,则效价1∶16被检血清出现“++”以上者为阳性;效价1∶4的孔出现“+”以下者为阴性;效价1∶4的孔“++”至1∶16孔“+” 以下者为可疑。
1.2.3数据统计与分析。 运用统计学软件SPSS 17.0统计软件对试验数据进行t检验。
2 结果与分析
2.1猪衣原体的血清抗体检测结果
由表1可知,共检测血清1 257份,其中阳性数232份,总阳性率为18.5%。其中,规模猪场956份样品,阳性193份,阳性率为20.2%;农户散养共301份样品,阳性数39份,阳性率为13.0%,规模猪场阳性率高于农户散养猪群。农户散养与规模饲养猪衣原体感染存在显著差异。
表1楚雄州部分猪场猪衣原体的血清抗体检测结果
饲养模式户数样品数阳性数 阴性数阳性率∥%
农户散养126301 3926213.0a
规模饲养3795619376320.2b
合计 1631 2572321 02518.5
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
2.2不同用途猪血清的检测结果
从表2可以看出,种用母猪的血清阳性率为26.5%,育肥猪血清阳性率为17.1%。种母猪血清阳性率较育肥猪高。母猪与肥育猪衣原体病感染无显著差异,但并不能说二者没有差异或差异很小。
3讨论
此次共调查了8个地区,包括规模猪场37个,126家散
表2不同用途猪血清的检测结果
饲养模式育肥猪 样品数阳性数阴性数阳性率∥%
母猪 样品数阳性数阴性数阳性率∥%
农户饲养248 28 22011.3a5311 4220.8a
规模飼养824155 66918.8a 13238 9428.8a
合计 1 072183 88917.1 18549 13626.5
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05).
养户,样本量共1 257份。结果表明,8个地区均有阳性检出,个别猪场之间阳性率相差较大,但各地区整体上阳性率相差不大。这说明目前该病在楚雄州猪群中已普遍存在。此次试验中样品采自楚雄不同地区,具有一定的代表性,降低了因个别猪场阳性率偏高所带来的误差。
国外Kauffold J等[6]认为猪衣原体病广泛存在于猪群中,近年来该病在我国也引起关注。2003年,高双娣等[7]研究表明甘肃省7个市(地)检出衣原体抗体阳性率为34.4%。2006年,王江辉等[8]报道了河南省部分地区平均抗体阳性率在25.5%左右。2009年,何存利等[9]报道了宁夏地区在猪群平均抗体阳性率为25%,其中母猪群的抗体阳性率为36.3%,育肥猪抗体阳性率为22.2%。笔者在楚雄州8个地区共检测1 257份样品,其中育肥猪血清阳性率为15.2%,母猪血清阳性率为26.5%,血清样品总阳性率为18.5%。2006年,刘伯庶等[10]检测发现红河州猪衣原体抗体阳性率为22.8%。2007年曹兴萍[11]等报道了楚雄州猪衣原体的抗体阳性率10.71%,与该试验中云南省楚雄州局部地区流行情况较为相近。这说明云南省猪衣原体的感染呈一定的流行趋势。
引起衣原体病的主要原因包括:①养殖规模小,不能做到自繁自养,盲目引种,忽略隔离检疫;②饲养管理及环境设施不健全,往往没有采取有效的猪衣原体预防接种措施;③猪群整体免疫水平低,患有其他免疫抑制性疾病时增加了感染该病的机会;④有的养殖户追求片面利益,对感染衣原体的病猪淘汰,净化不彻底,致使该猪群长期带毒;⑤未对猪场、猪舍及用具进行彻底消毒,造成猪舍卫生条件差,使病原微生物孽生;⑥没有执行全进全出制度,对可携带衣原体的动物未进行消灭,造成衣原体通过其他宿主传播给猪;⑦环境应激因素(如气候突变、饲料配方改变和饲料密度大等原因)都可诱发衣原体病。
通过近年来的血清学调查发现,衣原体也是导致猪发生繁殖障碍的主要原因之一。由于猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、细小病毒病和猪流感等均能引起种猪繁殖障碍,临床上猪发生繁殖障碍的确切原因较为复杂,增加了诊断难度。诊断要注意与猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、细小病毒病、乙型脑炎和弓形虫病等可引起怀孕母猪流产的疾病相鉴别。对猪衣原体引起猪的多发性关节炎、肠炎要分别与猪链球菌病、大肠杆菌病等相鉴别。
此次血清学检测结果表明,规模猪场和农户散养种母猪衣原体阳性率均高于育肥猪,其原因可能是种母猪饲养时间较长增加了感染的机率。因此,对衣原体的防治应重点在母猪上。此外,规模猪场母猪阳性率和育肥猪阳性率均高于农户饲养猪阳性率,其原因可能是规模化猪场猪群密集,猪接触概率增加等,说明规模猪场是防控该病的重点。
参考文献
[1] 赵书景,贺绍君,李文华,等.猪衣原体病的诊断与防治[J].猪病防控,2010(4):56.
[2] 储玉双,陶保华.猪衣原体病的研究进展[J].江西畜牧兽医杂志,2009(5):2-4.
[3] 徐浩天,王永坤,罗国琦,等.猪衣原体病的诊断与防治[J].河南畜牧兽医,2009,30(5):25-26.
[4] 储玉双,陶保华.猪衣原体病的研究进展[J].江西畜牧兽医杂志,2009(5):1-4.
[5] 李红林.猪衣原体病诊治 [J].畜牧兽医科技信息,2014(3):29-31.
[6] KAUFFOLD J,MELZER F,HENNING K,et al.Prevalence of chlamydiae in boars and semen used for artificial insemination[J].Theriogenology,2006,65(9):1750-1758.
[7] 高双娣,程淑敏,周继章,等.甘肃省部分猪场猪衣原体血清抗体的检测[J].中国兽医科技,2003,33(6):27-28.
[8] 王江辉,陈陆,任向阳,等.河南部分地区猪衣原体感染的血清学调查研究[J].动物医学进展,2006,27(3):88-89.
[9] 何存利,史晓,张皓弘,等.宁夏鹦鹉热衣原体血清学调查[J].上海畜牧兽医通讯,2009(5):25.
[10] 刘伯庶,王琼秋,刘佳升,等.云南省红河州猪衣原体病血清学调查[J].中国兽医杂志,2006,42(7):33.
[11] 曹兴萍,张以芳.云南省楚雄州猪衣原体病血清学调查[J].中国畜牧兽医,2007,34(10):110-111.
关键词猪衣原体病;血清流行病学调查;间接血凝试验
中图分类号S858.28文献标识码A文章编号0517-6611(2015)16-155-02
Serological Survey of Porcine Chlamydiae Infection in Parts of Chuxiong Prefecture in Yunnan Province
SU Yunshun1,ZHU Lingyun2,LIU Pingdan2 et al
(1. Animal Husbandry and Veterinary Station in Guantun Township, Yao’an County of Chuxiong Prefecture in Yunnan Province, Chuxiong,Yunnan 675305; 2. College of Animal Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming, Yunnan 650201)
Abstract [Objective] The research aimed to understand the prevalence of the porcine choamydiae infection in Chuxiong Prefecture of Yunnan Province.[Method] 1257 serum samples were collected from some largescale pig farms and scatterfed farms in Chuxiong Prefecture. The serological survey on porcine choamydiae infection was made by indirect hemagglutination (IHA)test.[Result] 232 positive samples were detected, and the total positive rate was 19.4%. Among 956 serum samples from largescale pig farms, 193 positive samples were detected and the positive rate was 20.2%. Among 132 serum samples from sows,38 samples were positive and the positive rate was 28.8%. Among 824 serum samples of finishing pigs, 155 samples were positive and the positive rate was 18.8%. Among 301 serum samples from scatterfed farms, 39 samples were positive and the positive rate was 13%. Among 53 serum samples of sows in scatterfed farms, 11 samples of sows were positive and the positive rate was 20.8%. Among 248 serum samples of finishing pigs, 28 samples were positive and the positive rate was 11.3%. [Conclusion] Swine choamydiae disease appeared a low epidemic trend in Chuxiong Prefecture of Yunnan Province.
Key words Porcine choamydiae; Serological invetigation;IHA
豬衣原体病是指由鹦鹉热衣原体引起的一类接触性自然疫源性人兽共患病,可引起多种动物和人发生多种疾病[1]。猪衣原体病可通过公猪精液传播,引起母猪流产或繁殖障碍[1-2]。猪衣原体病主要引起人或家畜流产综合征、肺炎、胸膜炎、心包炎、肠炎、关节炎、角膜炎以及睾丸炎、子宫炎、尿道炎等症状,人类的衣原体病以发热、头痛、沙眼结膜炎、肺炎和尿道炎为特征,且与动脉粥样硬化和冠心病有关[3]。该病常因菌株毒力以及猪的性别、年龄、生理状况和环境因素而表现出不同的症候群[2],在通常条件下衣原体隐性感染猪往往不表现出临床症状,但从其实质器官和分泌物、排泄物中可分离到病原,而临床表现型猪则表现出精神抑郁、懒于走动、体温升高、食欲减退或厥食,有时呼吸急促,偶有咳嗽,关节肿大、步态僵硬或发生跛行;眼结膜潮红,并呈水肿状,不断排出分泌物,怀孕母猪可发生流产、死胎或产下弱仔猪,有的母猪则由于木乃伊胎儿与胎衣粘连在一起,造成胎衣不下和不育症,哺乳仔猪多于产后2周左右表现为精神沉郁,步态不稳,寒颤,体温40.5~41.0 ℃,有的有神经症状,角弓反张,四肢呈游泳状,多发性关节炎,尤以前肢多见,咳嗽,气喘,跛行,关节肿大,抗生素治疗后症状缓解,但常易复发。有的可复发3~4次,形成僵猪,断奶后逐渐死亡,有的发病后很快死亡[4-5]。国际兽疫局将其列为二类传染病。该病在世界各地普遍存在,可造成很大危害和经济损失。猪衣原体病在临床症状上表现易与猪乙型脑炎、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、呼吸与繁殖综台征等多种疾病相似,常造成误诊,因此此次血清学调查可为楚雄地区防治猪衣原体病提供新依据。 1材料与方法
1.1材料
1.1.1研究对象。血清样本共1 257份,采集自楚雄州37个规模养猪场、126户农户。其中,规模猪场956份血清,农户散养猪血清301份。将采集于部分规模猪场不同年龄不同种用的血样,使用一次性促凝血真空采血管采血,在37 ℃恒温箱放置1 h再转入4 ℃冰箱中,放置1 ,h待血清自然析出后小心取出,置入一次性1.5 ml离心管中并保存备用。
1.1.2主要试剂。猪衣原体病IHA抗原及稀释液(批号为090810),购自中国农业科学院兰州兽医研究所。
1.1.3主要仪器。恒温水浴锅、4 ℃冰箱、-20 ℃冰箱、微量移液枪 、微型振荡器、37 ℃恒温箱
1.2方法
1.2.1正向间接血凝试验。将稀释液滴于96孔反应板中,每孔50 μl。取被检血清50 μl加入第1孔中,与稀释液混匀后吸50 μ1于第2孔,依次倍比稀释到1∶4 096,每孔加入25 μl抗原。设置阳性血清+抗原、阴性血清+抗原、稀释液+抗原作为对照。将反应板放在微型振荡器上振荡5~10 s,室温静置2 h后判定结果。
1.2.2结果判定。在对照试验成立的前提下,则效价1∶16被检血清出现“++”以上者为阳性;效价1∶4的孔出现“+”以下者为阴性;效价1∶4的孔“++”至1∶16孔“+” 以下者为可疑。
1.2.3数据统计与分析。 运用统计学软件SPSS 17.0统计软件对试验数据进行t检验。
2 结果与分析
2.1猪衣原体的血清抗体检测结果
由表1可知,共检测血清1 257份,其中阳性数232份,总阳性率为18.5%。其中,规模猪场956份样品,阳性193份,阳性率为20.2%;农户散养共301份样品,阳性数39份,阳性率为13.0%,规模猪场阳性率高于农户散养猪群。农户散养与规模饲养猪衣原体感染存在显著差异。
表1楚雄州部分猪场猪衣原体的血清抗体检测结果
饲养模式户数样品数阳性数 阴性数阳性率∥%
农户散养126301 3926213.0a
规模饲养3795619376320.2b
合计 1631 2572321 02518.5
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
2.2不同用途猪血清的检测结果
从表2可以看出,种用母猪的血清阳性率为26.5%,育肥猪血清阳性率为17.1%。种母猪血清阳性率较育肥猪高。母猪与肥育猪衣原体病感染无显著差异,但并不能说二者没有差异或差异很小。
3讨论
此次共调查了8个地区,包括规模猪场37个,126家散
表2不同用途猪血清的检测结果
饲养模式育肥猪 样品数阳性数阴性数阳性率∥%
母猪 样品数阳性数阴性数阳性率∥%
农户饲养248 28 22011.3a5311 4220.8a
规模飼养824155 66918.8a 13238 9428.8a
合计 1 072183 88917.1 18549 13626.5
注:同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05).
养户,样本量共1 257份。结果表明,8个地区均有阳性检出,个别猪场之间阳性率相差较大,但各地区整体上阳性率相差不大。这说明目前该病在楚雄州猪群中已普遍存在。此次试验中样品采自楚雄不同地区,具有一定的代表性,降低了因个别猪场阳性率偏高所带来的误差。
国外Kauffold J等[6]认为猪衣原体病广泛存在于猪群中,近年来该病在我国也引起关注。2003年,高双娣等[7]研究表明甘肃省7个市(地)检出衣原体抗体阳性率为34.4%。2006年,王江辉等[8]报道了河南省部分地区平均抗体阳性率在25.5%左右。2009年,何存利等[9]报道了宁夏地区在猪群平均抗体阳性率为25%,其中母猪群的抗体阳性率为36.3%,育肥猪抗体阳性率为22.2%。笔者在楚雄州8个地区共检测1 257份样品,其中育肥猪血清阳性率为15.2%,母猪血清阳性率为26.5%,血清样品总阳性率为18.5%。2006年,刘伯庶等[10]检测发现红河州猪衣原体抗体阳性率为22.8%。2007年曹兴萍[11]等报道了楚雄州猪衣原体的抗体阳性率10.71%,与该试验中云南省楚雄州局部地区流行情况较为相近。这说明云南省猪衣原体的感染呈一定的流行趋势。
引起衣原体病的主要原因包括:①养殖规模小,不能做到自繁自养,盲目引种,忽略隔离检疫;②饲养管理及环境设施不健全,往往没有采取有效的猪衣原体预防接种措施;③猪群整体免疫水平低,患有其他免疫抑制性疾病时增加了感染该病的机会;④有的养殖户追求片面利益,对感染衣原体的病猪淘汰,净化不彻底,致使该猪群长期带毒;⑤未对猪场、猪舍及用具进行彻底消毒,造成猪舍卫生条件差,使病原微生物孽生;⑥没有执行全进全出制度,对可携带衣原体的动物未进行消灭,造成衣原体通过其他宿主传播给猪;⑦环境应激因素(如气候突变、饲料配方改变和饲料密度大等原因)都可诱发衣原体病。
通过近年来的血清学调查发现,衣原体也是导致猪发生繁殖障碍的主要原因之一。由于猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、细小病毒病和猪流感等均能引起种猪繁殖障碍,临床上猪发生繁殖障碍的确切原因较为复杂,增加了诊断难度。诊断要注意与猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、细小病毒病、乙型脑炎和弓形虫病等可引起怀孕母猪流产的疾病相鉴别。对猪衣原体引起猪的多发性关节炎、肠炎要分别与猪链球菌病、大肠杆菌病等相鉴别。
此次血清学检测结果表明,规模猪场和农户散养种母猪衣原体阳性率均高于育肥猪,其原因可能是种母猪饲养时间较长增加了感染的机率。因此,对衣原体的防治应重点在母猪上。此外,规模猪场母猪阳性率和育肥猪阳性率均高于农户饲养猪阳性率,其原因可能是规模化猪场猪群密集,猪接触概率增加等,说明规模猪场是防控该病的重点。
参考文献
[1] 赵书景,贺绍君,李文华,等.猪衣原体病的诊断与防治[J].猪病防控,2010(4):56.
[2] 储玉双,陶保华.猪衣原体病的研究进展[J].江西畜牧兽医杂志,2009(5):2-4.
[3] 徐浩天,王永坤,罗国琦,等.猪衣原体病的诊断与防治[J].河南畜牧兽医,2009,30(5):25-26.
[4] 储玉双,陶保华.猪衣原体病的研究进展[J].江西畜牧兽医杂志,2009(5):1-4.
[5] 李红林.猪衣原体病诊治 [J].畜牧兽医科技信息,2014(3):29-31.
[6] KAUFFOLD J,MELZER F,HENNING K,et al.Prevalence of chlamydiae in boars and semen used for artificial insemination[J].Theriogenology,2006,65(9):1750-1758.
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[10] 刘伯庶,王琼秋,刘佳升,等.云南省红河州猪衣原体病血清学调查[J].中国兽医杂志,2006,42(7):33.
[11] 曹兴萍,张以芳.云南省楚雄州猪衣原体病血清学调查[J].中国畜牧兽医,2007,34(10):110-111.