臭蒿抗菌成分的分离、鉴定及其抗菌机理研究

来源 :武汉工程大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tzsxf668
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
臭蒿是菊科蒿属植物,臭蒿无水乙醇提取物具有抗真菌活性。本文以臭蒿作为实验材料,烟草链格孢菌和深绿木霉为供试菌种,研究臭蒿抗菌成分的提取方法,对抗菌成分进行分离、纯化和分析,并对其抗真菌活性和抗真菌机理进行初步探索。1.利用超声波辅助恒温磁力搅拌法提取臭蒿抗菌成分,通过抑菌实验结果和提取率的比较,得出提取臭蒿的条件,臭蒿粉粒径≤0.154 mm,提取溶剂为石油醚(II类),料液比1:15(g/mL)。石油醚提取液蒸干经乙醇溶解,过滤得到乙醇溶液,蒸干得臭蒿粗提物。臭蒿粗提物对真菌的毒力测定结果表明,其对烟草链格孢菌菌丝EC50=1.25 mg/mL,对深绿木霉菌丝EC50为2.51 mg/mL,对烟草链格孢子萌发的EC50=5.04 mg/mL,表明臭蒿粗提物具有较好抗真菌活性。2.利用色谱分离法对臭蒿粗提物进行粗分和细分,利用孢子萌发法对抗菌组分进行活性评价,采用高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)分析抗菌组分的物质组成。结果显示:臭蒿粗提物粗分得到13种组分(Fr.1Fr.13),其中组分Fr.5抗菌活性最好,对组分Fr.5细分得到4种组分(Fr.5.1Fr.5.4)。Fr.5.2对烟草链格孢菌孢子的EC50为0.57 mg/mL。LC-MS分析出Fr.5.2主要由去氧双羟基蒿甲醚(17.00%)、去氧双氢青蒿素(43.65%)、去氧青蒿素(16.15%)组成。以双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)为标准品,测得Fr.5.2中DHA的含量为40.95%,DHA对烟草链格孢菌孢子的EC50为2.70 mg/mL,表明Fr.5.2中主要抗菌物质为青蒿素衍生物。3.为了研究青蒿素衍生物的抗菌机理,测试Fr.5.2和DHA对烟草链格孢菌的抗菌活性、细胞膜完整度、胞内物质的泄露、菌体和孢子的影响。结果发现:Fr.5.2对烟草链格孢菌MIC(Minimum Inhibitory Concentration,)为1.25 mg/mL,MBC(Minimum Bactericidal Concentration)为2.5 mg/mL,DHA对烟草链格孢菌的MIC为5 mg/mL,MBC为10 mg/mL。0.625 mg/mL Fr.5.2和2.5 mg/mL DHA作用于烟草链格孢菌,在0-3 h,细胞膜完整度不断下降,胞内核酸大分子不断流失;SEM观察发现菌丝体细胞膜细小、有空洞,孢子表面也有凹陷;Fr.5.2和DHA还可以抑制麦角甾醇的合成,与空白组相比,麦角甾醇的含量分别降低29.77%,28.99%,孢子平均密度提高,但是萌发率降低。这些实验结果表明,青蒿素衍生物能够抑制真菌麦角甾醇的合成,破坏细胞膜,阻碍真菌细胞的新陈代谢,破坏真菌孢子,能有效的抑制、杀死真菌。
其他文献
在信赖保护原则的发源地德国,学者将信赖保护原则引入行政法的初衷是为了解决行政机关能否自由撤销行政行为的问题。这一原则要求行政机关重视相对人的合法权益,为相对人信赖利益保护划定了红线、树立起屏障。因此,笔者认为有必要加深对行政法上信赖保护原则的探讨,以期扩展和细化对行政法上信赖保护原则的立法,并通过行政机关和人民法院的准确适用,使这一原则能真正发挥起行政机关和行政相对人之间互信互惠的“桥梁”作用。在
并苯类化合物是目前研究最广泛的有机π功能材料之一,可应用于有机染料、有机场效应晶体管(OFETs)、有机光伏器件(OPVs)、有机发光二极管(OLEDs)和有机存储器等多个领域。为了进一
<正>教学内容:苏教版教材第五册第58—60页。教学目标:1.探索长方形和正方形特征,初步掌握长方形和正方形的特征及各部分的名称,了解它们之间的关系。2.培养学生的观察操作能
计算机技术的全面进步,商业型公司规模逐渐增长,计算机化管理软件,可大限度地避免手工记账带来的失误,现代化管理企业公司的商品采购、货品贩卖、商品储存运输管理等公司运营
因四川地区自然资源、地势地貌、人文历史等因素,四川古典园林有着不同于其他主流园林的造园背景和造园思想,孕育了四川古典园林独特的园林类型、园林艺术和风格。它与中国古典园林体系一脉相承,是中国古典园林的重要流派之一。同时又呈现出不同于江南园林、皇家园林和其他地域园林的独特美学特征。然而对于四川古典园林的研究现在尚未得到足够的重视,相关的分类研究尚处于待完善阶段。亭在古典园林中是重要的赏景、构景建筑,它
CBA联赛从1995年成立至今已有20多年历史,是我国具有较强影响力的职业体育联赛之一,代表我国竞技篮球运动的最高水平。由于经济体制的原因,我国体育赛事电视转播权的开发起步
随着年龄的增长,人体清除自由基的能力逐渐下降,环境污染的加剧也会引发体内更多自由基的产生,自由基的累积会造成体内各种大分子的损伤,研究也表明人体内自由基的水平与各种疾病都有一定的关联。一些临床试验显示,适当补充天然抗氧化剂能够提高机体的自由基清除能力。但部分天然抗氧化剂存在口服吸收缺陷如溶解度差、胃肠道稳定性差、口服生物利用度低等,只有解决这些口服吸收缺陷,才能充分发挥它们的抗氧化作用。此外,多种
后真相是指“诉诸情感和个人信仰相较客观陈述事实更能影响舆论形成的情况。”有着真相变得次要、情绪战胜事实的本质特征。本研究通过文献研究法、深度访谈法和话语分析法以江歌案为例,从微观层面上对后真相的构建过程进行了梳理,着重分析了在后真相中真相变得次要的原因、情绪战胜理智的过程、真相异化的过程和受众、媒体所扮演的角色四个问题。研究发现:首先,后真相是在受众和媒体的共振中构建的,社会进入失范性焦虑状态,媒
当前盾构法在地下空间的开发与应用方面得到了越来越多的重视与发展。对于修建在近海区域的隧道,由于水域环境复杂,盾构穿越地层差异性大,结构的受力特征尚不明确,例如水流对泥沙颗粒产生的拖拽力会使得河床发生冲刷,冲刷过大会严重影响衬砌结构受力的安全性与稳定性;其次就是水位变化频繁引起隧道外荷载不断变化,如何明确隧道外荷载动态响应特征,正确评价隧道的力学效应成为了研究问题的重中之重。鉴于此,本文采用文献调研
在国家提出的"互联网+行动计划"的国家战略的前提下,产生教育的新形态——"互联网+教育"。本文论述了在轻松共享各种在线教育资源,改变教育模式,加速教育的自我进化,面对"互