【摘 要】
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目的 研究脐带间充质干细胞获得纯化的高效方法及向软骨细胞的分化能力.方法 取人的正常分娩或剖腹产胎儿的脐带,用胶原酶和胰酶初步消化后,将流式细胞仪筛选得到的CD45(-)、
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院,上海组织工程重点实验室
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目的 研究脐带间充质干细胞获得纯化的高效方法及向软骨细胞的分化能力.方法 取人的正常分娩或剖腹产胎儿的脐带,用胶原酶和胰酶初步消化后,将流式细胞仪筛选得到的CD45(-)、CD90(+)细胞作为原代细胞进行培养,并用复合胶原酶差速消化法逐级传代、纯化细胞,每次传代后取部分细胞用作流式细胞仪分析细胞的CD45、CD90阳性比率;对P3代细胞向软骨细胞进行诱导.结果 流式细胞仪检测提示,采用流式细胞仪进行初次筛选并用复合胶原酶差速消化法逐级传代获得的P1、P2、P3代细胞中CD90的阳性率为(80.86±7.85)%、(95.86±3.28)%、(97.15±1.43)%,而CD45的阳性率为(2.53±0.28)%、(0.97±0.48)%、(0.05±0.01)%;向软骨细胞诱导结果提示P3代细胞有向终末软骨细胞分化能力,具有干细胞的特性.结论 采用流式细胞仪进行初次筛选并用复合胶原酶差速消化法能快速获得高纯度的具有向终末软骨细胞分化能力的人脐带间充质干细胞.
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