【摘 要】
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目的：组氨酸磷酸酶LHPP是一种新型的肿瘤抑制因子，iRGD是一种肿瘤穿透肽。本研究旨在利用iRGD的肿瘤靶向性和LHPP蛋白的细胞毒性，在分子水平构建一个融合蛋白，并对其进行异源表达，为后续深入研究该融合蛋白的生物学功能奠定重要基础。方法：通过分子生物学方法构建重组质粒pGEX-4T1-LHPP-iRGD，将重组质粒转入表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)，用异丙基硫代-β-D-半乳糖（IPTG）在不同的温度下对异源蛋白进行诱导表达，SDS-PAGE检测LHPP-iRGD蛋白的表达情况，Western b
【机 构】
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长沙医学院基础医学院;长沙医学院基础医学院;长沙医学院基础医学院;长沙医学院基础医学院
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目的：组氨酸磷酸酶LHPP是一种新型的肿瘤抑制因子，iRGD是一种肿瘤穿透肽。本研究旨在利用iRGD的肿瘤靶向性和LHPP蛋白的细胞毒性，在分子水平构建一个融合蛋白，并对其进行异源表达，为后续深入研究该融合蛋白的生物学功能奠定重要基础。方法：通过分子生物学方法构建重组质粒pGEX-4T1-LHPP-iRGD，将重组质粒转入表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)，用异丙基硫代-β-D-半乳糖（IPTG）在不同的温度下对异源蛋白进行诱导表达，SDS-PAGE检测LHPP-iRGD蛋白的表达情况，Western blot对重组蛋白进行鉴定。结果：成功获得了pGEX-4T1-LHPP-iRGD重组质粒，表达的融合蛋白分子量约为57kDa，IPTG诱导后的菌体蛋白与GST多克隆标签抗体进行免疫印迹反应出现阳性条带，LHPP-iRGD蛋白在E. coli BL2(DE3)中成功表达。
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