【摘 要】
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人星状病毒（Human astrovirus,HAstV）、肠道腺病毒（Enteric adenovirus,EAdV）是引起急性胃肠炎的两种常见病原体,目前尚未实现这两种病原体荧光定量RT-PCR的单管双重检测。为建立一种灵敏特异的双重荧光定量RT-PCR检测方法并应用于实验室样本检测,本研究选择HAstV、EAdV特异性引物和探针,优化反应体系和反应条件,并对该方法的灵敏性、特异性和稳定性进行
【基金项目】
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国家科技重大专项（项目号：2018ZX10711-001）,题目：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治； 国家自然科学基金（项目号：8160813）,题目：P[6]基因型轮状病毒跨物种传播的分子机制研究～～；
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人星状病毒（Human astrovirus,HAstV）、肠道腺病毒（Enteric adenovirus,EAdV）是引起急性胃肠炎的两种常见病原体,目前尚未实现这两种病原体荧光定量RT-PCR的单管双重检测。为建立一种灵敏特异的双重荧光定量RT-PCR检测方法并应用于实验室样本检测,本研究选择HAstV、EAdV特异性引物和探针,优化反应体系和反应条件,并对该方法的灵敏性、特异性和稳定性进行评价。结果显示,该方法针对HAstV和EAdV的检出限分别可以达到522拷贝/μL和53.5拷贝/μL;与多种常见和罕见的人腹泻病毒没有交叉反应;批内和批间等重复性实验变异系数均小于5%;灵敏度高于常规PCR。本研究提示,建立的HAstV、EAdV双重荧光定量RT-PCR检测方法具有较好的灵敏度、特异性和稳定性,可用于实验室HAstV和EAdV的快速筛查。
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