【摘 要】
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目的 研究人参皂苷Rb1(G-Rb1)对肾小管上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及可能机制.方法 采用10 ng/mL生长因子β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞HK-2发生EMT.观察10、20、30 μmol/L G-Rb1作用48h后HK-2细胞的形态学变化;测定1.0、2.5、5.0、10、20、30 μmol/L G-Rb1作用24h后人胚胎肾细胞HEK293中报告基因载体SBE转录活性,并测定上述浓度G-Rb1作用24 h后对HK-2细胞相对活力的影响.检测10、20、30μmol/LG-
【机 构】
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河南中医药大学中医药科学院,郑州450046;河南中医药大学药学院,郑州450046;郑州大学第一附属医院医学研究中心,郑州450052
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目的 研究人参皂苷Rb1(G-Rb1)对肾小管上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及可能机制.方法 采用10 ng/mL生长因子β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞HK-2发生EMT.观察10、20、30 μmol/L G-Rb1作用48h后HK-2细胞的形态学变化;测定1.0、2.5、5.0、10、20、30 μmol/L G-Rb1作用24h后人胚胎肾细胞HEK293中报告基因载体SBE转录活性,并测定上述浓度G-Rb1作用24 h后对HK-2细胞相对活力的影响.检测10、20、30μmol/LG-Rb1作用24 h后HK-2细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、纤连蛋白(FN) mRNA的表达;检测10、20、30 μnol/L G-Rb1作用24h后HK-2细胞中a-SMA、Smad家族成员3(Smad3)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、COL-Ⅰ、FN和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达.结果 10～30 μmol/L G-Rb1能够抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞发生EMT,显著抑制因TGF-p1刺激导致的SBE转录活性升高(P＜0.05),并且对HK-2细胞的相对活力无明显影响(P＞0.05).在TGF-β1诱导下,细胞中α-SMA、COL-I、FN蛋白及其mRNA和Smad3、p-Smad3蛋白的表达均显著上调(P＜0.05),E-cadherin蛋白的表达显著下调(P＜0.05);而G-Rb1则可有效地逆转上述蛋白或mRNA的表达.结论 G-Rb1可在一定程度上保护肾小管上皮细胞免受TGF-β1诱导引起的EMT,这可能与其抑制了TGF-β1/Smad3信号通路的激活有关.
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