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将人血清白蛋白第3结构域(3DHSA)与粒细胞集落刺激因子突变体(Nartograstim)融合基因克隆至载体pPICzαA,置于醇氧化酶启动子(AOX)和仪交配因子信号肽作用下构建分泌表达质粒,电击转化入毕赤酵母Gsll5。SDS—PAGE结果显示3DHSA—Nartograstim相对分子质量约为42kD,Westernblot证实其同时具有HSA和G-CSF的抗原性。建立融合蛋白表达的条件为:BMMY培养基pH6.0、1.5%甲醇、诱导84h,灰度扫描发现该条件下融合蛋白的纯度为79%。依次采用亲和