【摘 要】
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该研究通过构建EA.hy926细胞心肌缺血模型，对比2个开心散类方（补心汤和定志小丸）3个剂量组(500、200、100 μg·mL-1)对EA.hy926细胞活力的影响。而后基于TCMSP、TCMID、SYMMAP、STRING等公共数据库和KEGG通路分析等网络药理学基本方法，初步寻找开心散优效类方补心汤发挥心脏保护作用的分子机制。在异丙肾上腺素（isoprenaline，ISO）诱导的大鼠心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81973502）；
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该研究通过构建EA.hy926细胞心肌缺血模型，对比2个开心散类方（补心汤和定志小丸）3个剂量组(500、200、100 μg·mL-1)对EA.hy926细胞活力的影响。而后基于TCMSP、TCMID、SYMMAP、STRING等公共数据库和KEGG通路分析等网络药理学基本方法，初步寻找开心散优效类方补心汤发挥心脏保护作用的分子机制。在异丙肾上腺素（isoprenaline，ISO）诱导的大鼠心肌缺血模型上，进行补心汤药效学再评价，并采用蛋白印迹法（Western blot， WB）测定磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激B（phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B， PI3K/AKT）信号通路相关蛋白的表达。体外模型筛选研究发现，开心散不同配伍的2个类方中，补心汤显著提高缺血后EA.hy926细胞的活力，且效果优于定志小丸。网络药理学分析预测该方可能通过PI3K/AKT信号通路发挥心脏保护作用。动物实验验证研究中确证，补心汤治疗后模型大鼠心脏超声射血分数（ejection fraction， EF）和短轴收缩率（fractional shortening， FS）明显升高，左心室舒张前壁厚度（diastolic left ventricular anterior wall， LVAWd）、左心室收缩前壁厚度（systolic left ventricular anterior wall， LVAWs）和左心室舒张后壁厚度（diastolic left ventricular posterior wall， LVPWd）明显变厚，心率（beat per minute， BPM）和左心室舒张内径（diastolic left ventricular diameter， LVIDd）明显降低，心电图ST段得到明显改善；Masson染色显示补心汤恢复心肌厚度，减少胶原纤维，增加肌纤维，减少梗死面积，改善心肌缺血；同时补心汤抑制心肌缺血诱导的血清炎症因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α和interleukin-6，IL-6）和心肌酶（creatine kinase， CK和lactate dehydrogenase， LDH），增加大鼠心肌细胞p-AKT/AKT的比例，增加相关下游通路PI3K、NF-κB、IKK-α、Bcl-xl蛋白的表达，降低凋亡蛋白Bax蛋白表达。综上，补心汤显示出良好的心脏保护作用，其机制可能与PI3K/AKT信号通路关键靶蛋白相关。
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