研究北京地区耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌(CRAB)分子分型的主要型别及分布情况。
方法收集北京地区2010—2014年医院60岁以上的老年患者临床分离的非重复耐碳青霉烯类的CRAB 78株,用微量稀释法测定11种抗菌药物的药敏试验,采用改良的Hodge试验初筛碳青霉烯酶,多重PCR分析鲍曼不动杆菌OXA-23-like、OXA-24-like、OXA-51-like、OXA-58-like、IMP-1、VIM-2碳青霉烯酶基因,检测OXA-23-like、OXA-51-like插入序列IsAbal,采用三位点序列分型(3LST)对碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌同源性初步分型,根据药敏试验、碳青霉烯酶基因分型、3LST初筛结果和医院分布选出22株进行多位点序列分型(MLST)。
结果78株CRAB中OXA酶基因检测显示,所有菌株均携带OXA-51-like,74株检出OXA-23-like(94.8%),OXA-23-like阳性的菌株其ISAba1-OXA-23产物均为阳性。在检测的5种β-内酰胺酶基因中74株检出高产头孢菌素酶基因(AmpC)占94.8%;50株β-内酰胺酶型基因(TEM-1)占64.1%;5株超广谱β内酰胺酶型基因(PER-1)占6.4%;48株同时检出TEM-1、AmpC酶基因占61.5%;3株同时检出TEM-1、AmpC酶和PER-1型基因。使用3LST进行分型初筛,74株是Group分型Ⅰ型,属于欧洲克隆谱系Ⅱ;MLST分型中发现的6个ST型中,其中ST195、ST208、ST218、ST368均属于克隆复合体92(CC92);ST103型、ST500型为国内首次发现的两个新型别。
结论CC92克隆群为北京地区CRAB主要分布克隆株,属于经典的欧洲克隆谱系Ⅱ,其插入序列ISAba1介导OXA-23型碳青霉烯酶是北京地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯酶耐药主要的分子机制。多数菌株同时检出AmpC酶和TEM-1型-内酰胺酶基因。在新发现的2种型别中,主要是CC103克隆复合体。