背景 耶氏肺孢子菌（PJ）既可定植于肺部，亦可引起肺部感染。为避免临床过度治疗及延误治疗，识别定植与感染很重要。多项研究显示宏基因组二代测序（mNGS）技术及血清1,3-β-D葡聚糖定量检测（G试验）可辅助诊断耶氏肺孢子菌肺炎（PJP），但二者有无鉴别PJ定植和感染的截断值呢?目的 探讨肺泡灌洗液m NGS技术、血清G试验在判断PJ感染与定植中的价值及二者之间相关性。方法 收集2018年9月至2022年5月在江汉大学附属湖北省第三人民医院住院治疗，且行肺泡灌洗液m NGS技术检出PJ序列数的40例肺部感染患者病例资料进行回顾性分析。根据mNGS检出PJ是否抗PJ治疗分为PJ感染组21例，PJ定植组19例。收集患者一般资料包括性别、年龄、体质指数（BMI）、吸烟史、基础疾病及用药史[慢性肾脏疾病、血液系统疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、人类免疫缺陷病毒（HIV）感染、实体器官移植、慢性肺部疾病、糖皮质激素/免疫抑制剂使用情况]，临床症状（发热、咳嗽、咳痰、呼吸困难、胸痛、咯血），影像学特点（磨玻璃渗出影、间质改变、实变、结节、胸腔积液、囊状），实验室指标[白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）、乳酸脱氢酶（LDH）、动脉血氧分压/吸入氧浓度百分比（PaO2/FiO2）、CD4+T淋巴细胞计数]，绘制m NGS序列数、血清G试验判断PJ感染与定植的受试者工作特征曲线（ROC曲线），分析二者的相关性。结果 PJ感染组较PJ定植组糖皮质激素/免疫抑制剂使用率高（P＜0.05）;PJ感染组磨玻璃渗出影、间质改变比例高于PJ定植组（P＜0.05）;PJ感染组CD4+T淋巴细胞计数低于PJ定植组，而m NGS序列数、血清G试验高于PJ定植组（P＜0.05）;ROC曲线示mNGS序列数与血清G试验鉴别PJ感染与定植的最佳截断值分别为24个、106.7 ng/L,ROC曲线下面积（AUC）分别为0.95、0.89，灵敏度分别为95.2%、76.2%，特异度分别为78.9%、89.5%。Spearman秩相关结果示mNGS序列数与血清G试验水平呈正相关（rs=0.769、P＜0.001）。结论 PJ感染患者糖皮质激素/免疫抑制剂使用率高，影像学表现为典型磨玻璃渗出影及间质改变，外周血CD4+T淋巴细胞计数下降（尤其＜200个/μl），血清G试验及mNGS检出PJ序列数明显升高，分别≥106.7 ng/L、≥24个时，有助于PJ感染的诊断。