快速PCR扩增体系的建立及法医学应用

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目的 建立快速PCR扩增体系,探讨其在法医实践中的应用价值.方法 设置不同的缓冲液、酶浓度与MgSO4浓度、热循环参数等,观察不同参数对扩增结果的影响,建立快速PCR扩增体系.使用该体系对常见检材进行STR分型,与常规方法扩增的结果比较,考察其分型准确性与扩增用时.结果 本文建立的快速PCR扩增体系含DNA TyperTM 19试剂盒的Primer Mix(5×)2μL; TaKaRa试剂的Fast BufferⅡ(10×)1μL,SpeedSTARTMHS DNAPolymerase(5 U/μL)0.3μL,MgSO4(50mmol/L)为0.1μ.扩增程序为95℃ 120s;95℃ 2s、61℃ 15s,27个循环;72℃60s.结论 快速PCR扩增体系分型结果准确,用时仅19min,缩短了常规扩增用时,有较大的法医学应用价值.
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