【摘 要】
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几丁质的合成与降解之间的平衡关系影响着昆虫的生长发育，而几丁质合成酶1（chitin synthase 1,CHS1）是昆虫几丁质合成过程中的关键酶之一。本研究旨在使用饲喂法RNAi（RNAinterference）探究CHS1对茄二十八星瓢虫Henosepilachnavigintioctopunctata存活和发育的影响。基于从茄二十八星瓢虫基因组数据中获得的Hv CHS1序列，通过生物信息学
【机 构】
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华南农业大学植物保护学院/广东省生物农药创制与应用重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金（31972269,32172500）；
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几丁质的合成与降解之间的平衡关系影响着昆虫的生长发育，而几丁质合成酶1（chitin synthase 1,CHS1）是昆虫几丁质合成过程中的关键酶之一。本研究旨在使用饲喂法RNAi（RNAinterference）探究CHS1对茄二十八星瓢虫Henosepilachnavigintioctopunctata存活和发育的影响。基于从茄二十八星瓢虫基因组数据中获得的Hv CHS1序列，通过生物信息学方法分析其理化性质及与其他昆虫之间的同源性；运用RT-qPCR技术分析该基因的时空表达特性；通过饲喂体外合成和菌液表达的dsRNAs对茄二十八星瓢虫进行RNAi，统计死亡率、化蛹率，并通过苏木精-伊红（H＆E）染色观察Hv CHS1基因干扰后的表皮变化。Hv CHS1的开放阅读框为4680 bp，编码1559个氨基酸残基，相对分子质量为177.5 kDa。Hv CHS1在表皮中的表达水平高于其他组织。此外，通过摄食体外合成的ds Hv CHS1导致茄二十八星瓢虫存活率和化蛹率显著下降，存在明显的剂量依赖效应，摄食50 ng/μL、250 ng/μL和500 ng/μL ds HvCHS1的1龄幼虫死亡率分别为42.00%、82.00%和94.00%，摄食50 ng/μL、100 ng/μL和200 ng/μL ds Hv CHS1的4龄幼虫化蛹率分别为17.04%、34.07%和68.52%。而摄食菌液表达的ds Hv CHS1对1龄和3龄幼虫的致死率分别为64.00%和60.00%，但对成虫的存活率无影响。最后，H＆E染色显示，摄取ds Hv CHS1可抑制幼虫腹部新的角质层形成。本研究表明，HvCHS1参与幼虫蜕皮过程中新角质层的形成，可作为一个潜在的RNAi靶标基因，用于茄二十八星瓢虫的生物防治。
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