禽流感/新城疫抗体水平检测及其在生产中的应用

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禽流感(Avian Influenza,AI)和新城疫(Newcastle disease,ND)都是病毒引起的以家禽传染为主、带有显著临床特征的急性和高度接触性的烈性传染病,它们在世界范围内广泛传播,且病死率高,对世界各国的养禽业带来严重威胁与危害。家禽养殖是我国农业的支柱产业之一,在养殖过程中疫苗接种是预防和控制疫病的发生及流行重要措施。目前,对禽流感及新城疫的免疫程序研究较多,但由于家禽的品种类型、养殖方式、病毒流行毒株和流行环境等因素的变化,免疫程序仍需要不断进行优化。疫苗免疫后对血清抗体水平监测是评估疫苗的免疫效果和制定合理免疫程序的重要依据。本试验从研究母源抗体消长规律着手,主要采用血凝/血凝抑制试验(HA/HI)连续测定机体内多种亚型的禽流感(H5-11、H5-12、H7-2、H9亚型)和新城疫血清抗体和卵黄抗体水平,对山东和河南部分地区的鸡场开展流行病学调查和抗体水平检测分析,以期为鸡场的抗体监测提供方法参考,同时为有效防控禽流感等疫病的发生提供理论依据。1、雏鸡在出生后的第1、4、7、10、14、21、28、31 d进行心脏采血连续进行母源抗体水平检测,测定H5-11亚型的平均抗体滴度(log2)分别为4.80、4.43、4.06、3.43、2.10、0.70、0.06和0.00。H5-12亚型的平均抗体滴度分别为4.83、4.56、3.76、3.13、2.20、0.76、0.10和0.00。H9亚型的平均抗体滴度(log2)分别为4.56、4.40、3.86、3.33、1.66、0.80、0.40和0.20。H7-2亚型的平均抗体滴度(log2)分别为4.36、4.53、3.83、3.20、2.13、1.10、0.33和0.10。ND的平均抗体滴度(log2)分别为4.80、4.70、3.96、3.33、2.16、1.20、0.53和0.33。结果显示禽流感/新城疫的母源抗体水平在雏鸡孵化后具有保护作用,随后出现下降趋势,于10日龄前下降缓慢,10日龄后下降较快,在28日龄时几乎衰减殆尽。2、肉鸡于10日龄接种疫苗,分别于第10、17、24、31、38、45、52、60 d连续进行抗体检测,H5-11的平均抗体滴度(log2)分别为4.03、5.16、5.90、6.33、6.90、6.66、5.73、5.33;H5-12的平均抗体滴度(log2)分别为3.10、4.70、5.36、6.16、6.73、6.63、5.60、4.46;H9的平均抗体滴度(log2)分别为3.30、4.60、5.50、6.20、6.60、6.60、5.63、4.43;H7-2的平均抗体滴度(log2)分别为2.90、4.66、5.23、6.10、6.40、6.36、5.56、4.46;ND的平均抗体滴度(log2)分别为3.40、4.60、5.16、6.03、6.60、6.66、5.76、4.93。雏鸡在10日龄时体内的母源抗体水平较低,在疫苗注射后21~28 d,机体产生的抗体水平到达高峰。H5-11的抗体水平整体比H5-12、H9、H7-2、ND的抗体水平较高,说明其在机体内产生的抗体效果较好。3、对山东地区的3个已免疫禽流感及新城疫的蛋鸡场进行禽流感及新城疫的血清抗体与卵黄抗体检测并分析抗体水平的变化情况。以山东某鸡场1测定H5-11亚型禽流感发血清抗体和卵黄抗体水平为例,在免疫后20 d、40 d、60 d、90 d测得的血清抗体分别为9.2 log2和8.9 log2、9.5 log2、8.7 log2,卵黄抗体分别为8.9 log2、7.8 log2、7.8 log2、6.9 log2。结果表明,鸡只在疫苗免疫后产生的卵黄抗体与血清抗体水平呈正相关性,抗体水平在疫苗注射后40 d到达最高值,60 d开始下降。但血清样本的抗体效价比卵黄样本的高0.5~2个滴度。4、疑似感染禽流感病鸡临床症状为精神沉郁、食欲不振,呼吸困难以及神经症状(观星状)。病理变化表现为喉头、气管出血,腺胃乳头及黏膜肿胀、充血溃疡,其它器官亦有不同程度的出血。将采集的128份疑似禽流感病料进行病原实验室检测,4个地区的阳性检出率分别为33.33%,36.11%,39.28%和36.36%,总体检出率为35.93%。5、在随机采集的960份血清样品中,测定禽流感H9亚型平均抗体滴度达到8.87log2,抗体合格率(HI≥4 log2)为93.26%(900/960)。对1600份鸡蛋卵黄抗体检测结果显示,H9亚型AIV平均抗体滴度为7.68log2,抗体合格率(HI≥4 log2)为90.06%(1441/1600)。结合养殖场的免疫接种情况综合分析,卵黄抗体水平偏低,需要进一步强化免疫和改进免疫程序。
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