妊娠糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）是一种首次被确诊于妊娠期内的糖尿病。随着人民生活水平的不断提高,GDM的发病率也逐年攀升,严重危害到孕妇及胎儿的健康,甚至危及围产儿生命。氧化应激（oxidative stress,OS）是指机体在遭受一些有害刺激时,活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）和活性氮自由基（reactive nitrogen species,RNS）生成过快或过多,超过机体对其的清除能力,引起体内氧化作用与抗氧化作用紊乱,表现为ROS增加和（或）抗氧化系统功能障碍,是细胞损伤的主要原因[1]。母体持续的高血糖,不仅导致ROS大量产生,而且会损伤抗氧化系统的抗氧化能力,最终导致OS的发生。在体外实验中,添加抗氧化剂后,能够有效的减少GDM引起的胚胎细胞凋亡,所以,有些科学家认为OS引起的胚胎细胞过度凋亡是GDM引起胚胎发生畸形的重要机制[2,3]。Reece EA等[2]发现在妊娠期糖尿病中,由细胞凋亡导致的胚胎发育畸形,可能与胚胎中被激活的JNK1/2有着极为密切的联系。而GDM孕鼠在使用过抗氧化剂后,可以有效抑制JNK信号通路的活性,预防或挽救未发生或已经发生的胚胎发育畸形。本研究通过构建GDM孕鼠模型,继而得到脊柱发生畸形的胎鼠,通过检测其脊柱组织中反映OS程度的特异性指标——丙二醛（MDA）的含量,并测定胎鼠脊柱组织中磷酸化c-jun氨基末端激酶（p-JNK）以及凋亡诱导因子Bax的表达情况。并且通过抑制JNK信号通路,探讨JNK在妊娠糖尿病致胎儿CS中的作用,为临床预防、诊断和监测妊娠糖尿病孕妇胎儿发育畸形提供强有力的理论支持。第一部分 GDM孕鼠模型的构建目的:探究在建立GDM孕鼠模型时,不同剂量的链脲佐菌素（STZ）对模型血糖稳定性的影响,为GDM致胎儿CS机制的探究提供良好的实验基础。方法:取8周龄C57BL/6J孕鼠（孕期0-5d）48只,随机分为4组,每组12只,分别记录每只孕鼠的体重、随机血糖和空腹血糖。在禁食不禁水12h后,分别腹腔注射STZ 30mg/kg（低剂量组）、40mg/kg（中剂量组）、50mg/kg（高剂量组）和等量的柠檬酸钠缓冲液（对照组）,给药1h后恢复正常饮食,连续三日。于妊娠第5-5、10.5、15.5、20.5d测随机血糖,并观察孕鼠体重、摄食量、饮水量、皮毛及精神状态的变化,比较不同STZ剂量对GDM孕鼠成模率、死亡率和转阴率的影响。将孕鼠在妊娠20-5d解剖,观察其胎盘、羊水及子鼠的发育情况。结果:中剂量组（40mg/kg）雌鼠在妊娠后5-5d表现出明显的糖尿病症状,其成模率为（83.3%）,死亡率为（16.7%）,转阴率为0%。中剂量组与对照组妊娠第20-5d随机血糖值（mmol/L,18.2±3.0 vs 6.0±1.0）比较,差异具有统计学意义（P<0.05）,其高血糖的状态持续时间较长且稳定。结论:以STZ 40mg/kg连续腹腔注射三天的方式建立GDM孕鼠模型,其成模率高、死亡率低且效果持续,是建立GDM孕鼠模型相对合适的方法。第二部分 氧化应激诱导的JNK信号转导通路在妊娠糖尿病致胎儿先天性脊柱侧凸中作用的研究目的:1-检测OS标记物丙二醛（MDA）与p-JNK蛋白在GDM孕鼠所育胎鼠脊柱组织中的表达情况,并分析OS与JNK的相关性。2-观察凋亡诱导因子Bax蛋白在GDM孕鼠所育胎鼠脊柱组织中的变化。方法:采用比色法对GDM孕鼠（GDM组）和正常妊娠孕鼠（对照组）所育胎鼠脊柱组织匀浆中MDA含量水平进行检测。采用Western Blotting法检测GDM组、SP组（JNK抑制剂SP600125）和对照组孕鼠所育胎鼠脊柱组织中p-JNK蛋白与Bax蛋白的表达水平。结果:1.在GDM组胎鼠脊柱组织中,MDA的含量显著高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。2-在GDM组胎鼠脊柱组织中,p-JNK的表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义（P<0-05）;在SP组胎鼠脊柱组织中,p-JNK的表达水平显著低于GDM组,差异具有统计学意义（P<0-05）。3-在GDM组胎鼠脊柱组织中,MDA水平与p-JNK蛋白表达水平呈现明显的正相关关系（r=0-773,P<0.05）。4.在GDM组胎鼠脊柱组织中,Bax的表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义（P<0-05）;在SP组胎鼠脊柱组织中,Bax的表达水平显著低于GDM组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.GDM孕鼠所育胎鼠脊柱组织中发生了氧化应激,且氧化应激程度与JNK信号通路的激活呈正相关,p-JNK表达升高可能与GDM致胎鼠脊柱畸形有关。2-激活的JNK信号通路可能导致凋亡诱导因子Bax在GDM孕鼠所育脊柱畸形胎鼠的脊柱组织中高度表达,导致胎鼠脊柱发生畸形。