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柠檬(Citrus limon(L.)Burm.F.)系芸香科柑橘属常绿果树,其风味独特,富含Vc等多种营养物质,兼具药食两用价值,深受广大消费者喜爱,市场需求增长空间很大。云南柠檬一年有两批较为集中的花果,分别为春花果(7-10月,春花夏熟)和秋花果(3-6月,秋花春熟),春花果占比75%左右。其中秋花果是其它产地少有的特殊批次果实,收获期正值春季鲜果淡季,市场价格高,经济效应显著。所以,调控柠檬秋花果以实现柠檬两季结果是当地柠檬产业高质量发展与市场所需,但秋花果产量、品质波动较大,有关柠檬两季结果调控措施的研究较为缺乏。本研究采用问卷结合采样测定分析柠檬园施肥及养分状况对两季果实产量、品质的调控;采用田间试验阐明疏花疏果、水分胁迫和喷施激素对柠檬两季果实产量、品质及养分利用的调控;采用盆栽试验,从秋花果发育过程中花芽分化的形态学、生理代谢和分子生物学方面揭示水分胁迫和喷施激素对开花调控机制。主要研究结果如下:(1)柠檬园养分状况及施肥对春/秋两季果实产量、品质的调控。云南德宏地区29个代表性柠檬园的调查结果表明,柠檬春花果产量显著高于秋花果,但秋花果品质更优,维生素C(Vc)、可溶性固形物(TSS)和可滴定酸(TA)含量显著高于春花果;春/秋花两季果叶片及果实矿质养分含量及累积量差异显著,具体表现为:秋花果叶片N、K含量显著高于春花果叶片而Ca、Mg含量显著低于春花果叶片;春、秋花果N、K、Fe、Zn和B累积量差异显著且秋花果K、Fe、Zn和B累积量高于春花果。丰富的有机质及较高的Mg、Mn、B、K、Ca含量是两季果实优质的重要土壤条件,能增加春秋花两季果的果实纵径及TSS含量,同时促进秋花果横径及Vc含量的增加;高的土壤K、Ca含量降低果实TA含量,但高含量土壤有效N影响秋花果可滴定酸和可溶性固形物含量及出汁率,降低Vc含量,而高的土壤Cu、Fe、P含量能增加Vc含量。因此,德宏地区柠檬果园土壤酸化严重,果园施肥主要以化肥为主,建议适当调整土壤p H,增加土壤有机质,提高K肥比例,注意补充Ca、Mg、B和Zn肥。柠檬叶片养分含量会影响春花果的果实品质指标,但对秋花果品质的影响较小,叶片P、Mn含量与春花果Vc含量呈正相关,叶片Mn、P、N、Zn、Mg、Ca含量与秋花果TA含量呈正相关。叶片养分含量对柠檬产量有影响,其中叶片P、Mn含量与春花果产量及两季总产量呈正相关。柠檬果实养分含量对果实品质关系影响不大,对柠檬产量的影响不显著,其中果实Mg、K含量与春花果产量及两季总产量呈正相关,果实Mn含量与秋花果产量呈正相关。这些结果说明,养分管理可以调控柠檬两季果实产量、品质。(2)疏花疏果措施对柠檬春/秋两季结果产量、品质及养分累积的调控。连续4年田间疏花疏果田间小区试验结果表明,疏花疏果措施可以显著增加秋花果产量,尽管会因减少春花果产量而导致全年总产量下降,但显著增加整体经济效益;疏花疏果极显著增加两季柠檬果实纵径、Vc、TSS及TA含量;显著增加柠檬秋花果N、P、K养分含量、春/秋两季果果实K和Ca含量,显著降低春花果N、P、Fe和Mn含量而提高秋花果N、P、Fe和Mn的含量;提高春花果Mg、Zn和B含量而显著降低秋花果Mg、Zn和B的含量。说明,疏花疏果既能够增加秋花果产量而增加经济效益,也能够调控养分含量和提高品质。(3)水分胁迫和激素对柠檬开花、产量、品质及养分累积的调控。水分胁迫和激素调控的盆栽试验结果表明,水分胁迫通过抑制果树营养生长而促进柠檬成花,从而显著提高成花量和座果率(是对照的6.7倍),显著降低秋花果Vc和TA含量而增加果实TSS含量,显著增加叶片N、P、Fe和Cu含量和显著降低叶片Mn含量和C/N比。喷施抑制剂赤霉素(PBZ)600 mg/L时,显著降低柠檬单果重、果实纵径、横径及皮厚和Vc含量而显著增加果实出汁率和TSS含量;喷施GA可以抑制柠檬成花。综合而言,控水15%、喷施PBZ 600 mg/L以及两者联合(CW15+PBZ 600)均显著提高秋花果产量,但对品质影响较小;可以推荐赤霉素抑制剂PBZ最佳喷施浓度为830 mg/L。(4)水分胁迫与激素调控柠檬成花的机制。水分胁迫诱导柠檬开花且促进腋芽向花芽转化,3-4 d快速分化产生花器官原基,2-3周形成花芽。RNA-seq转录组学分析共鉴定到1638个差异表达基因(DEGs)。通过GO富集分析和KEGG途径分析,DEGs主要与开花、激素生物合成或新陈代谢有关。基于转录组数据的选择性剪切鉴定到许多与开花相关的选择性剪切,特别是成花素FT在干旱诱导柠檬开花过程中发生了选择性剪切,分离到了CiFT的两个选择性剪切本。利用实时定量PCR分析验证了差异表达基因的表达模式,与转录组测序数据一致。干旱处理过程中检测激素含量发现,在处理初期,IAA的含量升高,一直维持到恢复供水;ABA的含量上升,恢复供水后,含量下降,恢复到干旱初期前的水平。激素诱导开花基因发现成花素FT(t CiFT)在叶片中表达量可以显著被ABA和PBZ处理诱导,但受GA3和NAA抑制,两个剪切本CiFTα和CiFTβ的表达模式与t CiFT类似,成花抑制基因CiBFT和CiTFL1在芽中的累积一直受到ABA的诱导,CiELF3,CiELF4和CiSPL6等基因无明显变化。综上所述,本文针对云南德宏地区柠檬错季生产提高秋花果产量品质的产业需求,通过调查分析和试验研究,明确了养分、水分、激素及疏花疏果调控柠檬秋花果产量品质及养分积累的作用,阐明了柠檬两季果实产量品质与施肥及树体养分、花果管理的关系,提出柠檬“春花果提质、秋花果增产”的养分管理策略,形成了水分胁迫与激素提高柠檬秋花果产量品质的技术方案;发现成花素基因FT通过选择性剪切参与干旱调控开花,为多年生木本植物成花调控理论和实践提供了分子证据。