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猴头菌（Hericium erinaceus）是一种珍贵的药膳两用菌。一般认为，猴头菌的主要活性物质为多糖、多肽和脂肪族酰类物质，其中研究的焦点大多集中在猴头菌多糖。已有报道表明，猴头菌作为一种药用真菌，其独特的药效并非完全由单一的成分所起的作用，而是由多种活性成分共同作用的结果。因此，进一步探明猴头菌活性成分对开发和利用其药用价值具有重要指导意义。基于此，本文对一株已用于药品生产的猴头菌(HTDB)及其提取物的组成成分进行了分析，并着重在其甾醇类化合物和腺苷成分方面作了详细研究，同时为了确立该菌种的分类地位和亲缘关系，从而为进一步找寻有用物质提供线索，本文还对该猴头菌菌种作了基于rDNA基因内转录间隔区（internal transcribed spacer ITS）序列的初步系统学研究以及猴头菌属的分子鉴定。 本论文研究方面包括两章共4个部分： 1．猴头菌醇提浸膏和水提浸膏甾醇类化合物的比较研究 本部分旨在研究猴头菌(HTDB)甾醇类化合物，探讨醇提和水提浸膏疗效差异的药化基础。利用气质联用色谱（CC-MS）方法对猴头菌甾醇类物质组成进行分析，并采用高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）及其它生化分析手段比较了猴头菌及其两种方法提取物的成分。结果表明，在猴头菌丝体中存在含量较高的麦角甾醇，同时首次发现猴头菌含有麦角甾-8（14）-烯-3β-醇、β-谷甾醇和4个双键的C28甾醇化合物。醇提浸膏较水提浸膏在粗多糖、水溶性蛋白、脂肪酸方面没有明显优势，但醇提与水提浸膏在甾醇类物质含量上存在显著差异。这说明猴头菌甾醇类化合物主要存在于醇提浸膏中。 2．猴头菌及其药物制品腺苷等药效成分分析 本部分通过薄层层析、HPLC方法着重分析了猴头菌的腺苷成分，并对猴头菌（HTDB）的药物制品-胃乐宁浸膏的组成成分和矿质元素进行了测定。研究发现猴头菌丝体中存在着较高含量的腺苷，同时在其固体发酵培养物、浸膏和片剂中均检测到了一定含量的猴头菌腺苷，腺苷含量依次为：浸膏>片剂>固体培养物。胃乐宁浸膏的主要成分是糖、蛋白和灰分，并含有多种对人体有益的矿质元素。 3．猴头菌rDNA ITS区间的序列分析及其系统学研究 本部分测定了猴头菌 南京帅范人学2002届阶 I学位论义 猴头菌药效成分研究和猴头菌属的分下生物学鉴定 （HT。。）的ITS序列，与其所属的猴头菌属（Hericium）内各菌种作了 ITS序列的比较和 分析，并进行了基于ITS的初步系统学研究。序列分析发现，猴头菌属（Hericium）内 ITS序列的相似性很高，以此将猴头菌属（Hericium）与同担子菌亚纲 （Homobasidiomycetidae）有关目、科的菌株的ITS序列置于一个较高的分类阶元上重建 系统进化树，结果显示，猴头菌属聚为一个独立的分支，其系统发育关系与以前文献报 道的很相近，这说明，ITS序列用于在科、属级分类阶元的聚类具有一定的可行性。 4．猴头菌的特异性PCR鉴别 本部分旨在建立一种简便、实用的猴头菌属药用真 菌 DNA分子鉴定方法。根据 29种亲缘关系相近或常见食用菌的rDNA ITS序列数据库， 找出猴头菌属与其它种有明显区别的位点，设计一对专用于鉴定猴头菌属的特异性引 物，用该对引物扩增提取自 4株猴头菌及相关菌种共 16个样品的 DNA模板。在 57℃ 复性温度下，4个猴头菌的DNA模板均能得到约300hp的单一扩增条带，而其它菌种 的DNA模板在相同条件下则无扩增产物，以此可特异性地鉴别猴头菌属真菌。