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鱼类和所有其他生物一样,生存生长过程中需要营养物质提供生命活动所需的能量。鱼类在进化过程中,分化出不同的食性,鱼类按照食性可分为肉食性、植食性、杂食性类型,在水生生态系统中各自发挥着不同的功能。本文研究不同食性鱼酯酶(EST)及α-淀粉酶(α-AMY)同工酶的表达差异及相互关系和几种不同食性鱼LPL基因序列差异,从分子角度研究鱼类能量传输途径的差异,对认识水生态系统中鱼类不同食性的形成及功能作用具有重要意义。本研究分为两个部分,第一部分为同工酶研究,采用不连续聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳法分析不同食性鱼的酯酶(EST)和α-淀粉酶(α-AMY)同工酶特性;第二部分为基因研究,应用基因克隆技术,对草鱼LPL基因部分序列进行克隆与分析,了解不同食性鱼的LPL基因差异。同工酶研究,采用不连续聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳法,对广东鲂(Megalobrama terminalis)、?(Hemiculter leucisculus)、鲮(Cirrhina Cuvier)、草鱼(Ctenopharyngodonidellus)、青鱼(Mylopharyngodon piceus)、鳜(Siniperca-chuatsi),6种不同食性鱼的肝脏、肌肉、心脏、眼、鳃、肾组织进行研究,分析酯酶(EST)及α-淀粉酶(α-AMY)同工酶,得到同工酶电泳图谱。根据谱带迁移率的不同,获得19种EST同工酶,分别为EST1~EST19;α-AMY同工酶共检测到5种,分别为α-AMY1~α-AMY5。结果表明:这六种不同食性鱼6种组织中均存在EST和α-AMY同工酶的分布,他们具有明显的组织特异性;在这些鱼中EST同工酶的种类和表达程度较α-AMY同工酶都占优势;肝脏和肾脏中EST和α-AMY同工酶的活性高于其他组织;EST和α-AMY同工酶,在不同食性鱼中表现出明显的差异,通过对EST和α-AMY同工酶的特性分析,可了解并研究鱼类当前的食性状态,进一步掌握鱼类栖息环境的营养源与生态状况。基因研究,针对草鱼LPL基因序列进行克隆分析。应用PCR技术,获得长度为1058bp的LPL基因部分序列,对其进行分析,结果表明得到1058bp序列,包括外显子I部分68bp,外显子2部分169bp,和内含子I全长821bp。外显子部分与NCBI数据库中查询得到的草鱼脂蛋白酯酶(LPL)基因m RNA序列(FJ716100.1)相应的外显子部分相似度为99.58%。测得的草鱼脂蛋白酯酶(LPL)基因外显子部分序列与NCBI数据库中查询的5种鱼类的脂蛋白酯酶(LPL)基因序列的相应部分进行相似性比对,结果显示,草鱼和鲢、团头鲂、翘嘴鲌、鲤、鲫相似度分别为:98.3%、95.8%、95.8%、84.4%、83.5%;草鱼和鲢;翘嘴鲌和团头鲂;鲤和鲫分别聚在一起,然后再聚为一支。