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帕金森病(PD)又名震颤麻痹,是一种慢性的中枢神经退行性疾病,多发于中老年人群,是继阿尔兹海默症后的第二大神经退行性疾病,其特征是黑质致密部多巴胺能神经元的缓慢、进行性退化,导致持续的认知和行为障碍。PD是一种家族性和散发性的特异性疾病,与遗传和环境等因素有关,但具体的发病原因和致病机制尚不明确。目前左旋多巴仍然是临床上治疗PD的主流药物,主要是通过补充多巴胺的缺乏来改善症状,但不会延缓疾病的进展且长期服用会导致药物疗效降低,产生严重的副作用。淫羊藿苷(ICAR)是一种从中药淫羊藿中提取的黄酮类化合物,研究表明ICAR对PD有效,其机制是对PD动物模型中多巴胺(DA)神经元的神经保护作用。但是其水溶性差,口服利用率低,体内清除速率快,从而制约了ICAR的研究和临床应用,因此设计新型给药系统十分重要。本研究构建了一种新颖的淫羊藿苷/羟丙基-β-环糊精包合物(ICAR/HP-β-CD)给药系统,既可改善ICAR的水溶性,增加其生物利用度,又能达到药物控释的目的;采用经鼻给药方式,将淫羊藿苷/羟丙基-β-环糊精包合物组装温度敏感型原位水凝胶(ICAR/HP-β-CD-ATG),可使药物缓慢释放,经鼻入脑达到治疗的靶部位,充分地发挥治疗PD的作用。第一部分,采用饱和水溶液的包合方法,制备ICAR/HP-β-CD,采用正交实验优化制备工艺,采用相溶解度法研究主-客体分子间的包合比和包合常数,通过红外光谱(FT-IR)分析、差示扫描量热(DSC)分析、核磁共振波普分析(1H-NMR)、薄层色谱分析(TLC)方法对包合物的化学和材料学特征进行表征。正交试验结果表明制备ICAR/HP-β-CD最优处方为:HP-β-CD浓度为6%、包合时间是4 h,包合温度35℃。在此条件下制备的ICAR/HP-β-CD载药率最高为7.99%。表征分析实验结果表明ICAR能够包合于HP-β-CD分子空腔中。第二部分,利用泊洛沙姆的温敏特性,冷法磁力搅拌制备ICAR/HP-β-CD-ATG,通过正交实验,以鼻腔的生理温度为指标,筛选出具有最佳胶凝温度的处方,用与鼻腔环境p H值相同的磷酸盐缓冲液为释放介质进行药物的体外释放研究,通过药物的累积释放量来评价该体系的缓释效果。结果表明在温敏自组装的水凝胶(ATG)的处方研究中,根据凝胶的流变学特性确定最优凝胶处方:泊洛沙姆407:泊洛沙姆188的比例为16%:2%。体外释放结果表明到24 h时,凝胶的累积释放率可达到98.64±1.08%,表明泊洛沙姆可作为ICAR的良好释放载体。第三部分,实验通过鼻腔给予百草枯(PQ)温敏凝胶建立小鼠帕金森病(PD)模型。通过罗丹明B(RB)标记的ICAR/HP-β-CD-ATG考察温敏凝胶在正常小鼠体内的组织分布及其代谢情况,分析经鼻给药的药物体内过程。通过开场实验,悬挂实验、爬杆实验、游泳实验研究ICAR对PD小鼠行为能力的影响,通过高效液相电化学检测法考察小鼠脑组织纹状体中多巴胺(DA)及其代谢产物二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量,运用Real-time RT-PCR法检测PD小鼠纹状体中炎症、凋亡、氧化应激相关基因及神经生长因子受体基因表达情况,运用生化试剂盒检测小鼠纹状体中线粒体复合体I的酶活性,运用免疫荧光法考察黑质部位酪氨酸羟化酶(TH)的表达情况,运用TUNEL荧光染色法考察PD小鼠黑质中细胞凋亡,探讨ICAR/HP-β-CD-ATG经鼻给药对PD模型小鼠的治疗作用及其机制。小鼠荧光示踪结果表明ICAR/HP-β-CD-ATG经鼻给药可使药物快速分布于脑组织,并经肝脏和肾脏代谢后排泄出体外。行为学实验表明药物对PD模型小鼠运动能力及认知能力改善具有一定的效果,高效液相电化学检测表明药物可提高纹状体中DA的浓度,其代谢产物HVA、DOPAC的浓度也相应变化,Real-time RT-PCR实验结果表明药物可通过下调纹状体中炎性因子IL-1β及MCP-1 m RNA表达降低小鼠纹状体中炎症反应,通过上调抗凋亡因子Bcl-2、Bcl-x L m RNA表达及下调促凋亡因子Caspase-3、Bax m RNA表达抑制纹状体中细胞凋亡,通过下调CAT、HO-1 m RNA表达减少PD小鼠模型中氧化应激反应,通过上调神经生长因子受体Ngfr m RNA表达启动神经重塑。线粒体复合体I酶活性检测表明ICAR可通过增加线粒体复合体I酶的活性缓解PD症状,免疫荧光染色实验表明药物可通过增加TH阳性细胞数量,增加DA分泌改善小鼠PD症状,而阳性对照药L-DOPA可直接增加脑内DA含量,不能增加黑质中TH阳性细胞数量;TUNEL染色实验结果表明药物可通过减少黑质中凋亡细胞数量改善PD模型小鼠症状,而阳性对照药左旋多巴可增加黑质中的细胞凋亡数量。上述结果提示ICAR/HP-β-CD-ATG能够控释淫羊藿苷,并通过经鼻给药的方式将其靶向输送至脑组织,提高了ICAR的生物利用度,发挥较好的PD治疗优势。