热、超高压结合一些化学物质能够对芽孢内膜流动性及通透性产生一定的影响,芽孢内膜流动性及通透性的变化,可能是导致芽孢被杀灭的重要原因。因此,本文以枯草芽孢杆菌芽孢为研究对象,首先对1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）荧光探针标记芽孢内膜的条件进行优化,然后通过荧光偏振法和流式细胞术研究不同处理下枯草芽孢杆菌芽孢内膜流动性和通透性的变化,同时采用分光光度法检测芽孢内容物的释放情况,并利用平板计数法研究不同处理后芽孢的存活情况。具体研究内容及主要结论如下:（1）研究了 DPH标记芽孢内膜的最佳条件。芽孢形成前标记时,最适宜的培养时间为7天,培养时间过长,荧光强度没有显著变化,最适标记浓度为2.5×10.6mol/L。芽孢形成后标记的最优结果为,芽孢悬浮液中加入DPH溶液使其浓度为3×10-6 mol/L,50℃条件下,避光温育30 min。结果显示,芽孢形成前后进行标记,都能够使DPH标记在芽孢内膜上。通过芽孢形成前后标记效果的对比,芽孢形成后进行标记的荧光强度显著高于芽孢形成前标记的荧光强度。（2）研究了热结合不同化学物质处理对芽孢内膜流动性及通透性的影响,并进一步研究了其对芽孢的杀灭效果。热结合不同化学物质处理后,芽孢内膜流动性都会出现不同程度的变化,其中热是芽孢内膜流动性增加的一个原因,热结合的化学物质中,一部分化学物质（乙醇、Nisin）能够进一步的增加芽孢内膜的流动性,另一部分化学物质（pH=1、NaCl）会减弱热对芽孢内膜流动性增强的效果。热结合不同化学物质后,都能促使芽孢内容物释放,导致芽孢悬浮液OD600值得降低。热结合不同化学物质对芽孢内膜通透性有一定影响,其中乙醇和Nisin处理对芽孢内膜造成的损伤程度最大。热结合乙醇、NaCl及Nisin处理后,芽孢内膜流动性及通透性的改变可能导致水分子更易进入到芽孢内,芽孢对热及化学物质的抗性降低,从而对芽孢产生杀灭效果。热结合pH=1处理后,芽孢内膜流动性及通透性没有发生明显变化,却对芽孢产生了杀灭效果,说明芽孢内膜流动性和通透性的增强是芽孢被杀灭的一个重要原因,但热结合强酸处理通过其他途径导致芽孢的死亡。（3）研究了超高压结合不同化学物质处理对芽孢内膜流动性及通透性的影响,并进一步研究了其对芽孢的杀灭效果。超高压结合不同化学物质处理对芽孢内膜流动性的影响主要分为两类,一类是结合乙醇、Nisin等物质,使芽孢内膜流动性增强,另一类是结合不同pH和NaCl,使得芽孢内膜流动性降低。芽孢内膜流动性增强后,水分子可透过芽孢内膜进入到芽孢内,降低芽孢对热的抗性,但由于孢外壁及皮层等芽孢抗压关键结构的存在,芽孢对超高压仍存在抗性,同时化学物质无法进入芽孢,导致芽孢内膜流动性的变化并没有降低芽孢对超高压和几种化学物质的抗性,芽孢无法被杀灭。超高压结合几种化学物质处理后,芽孢OD600值都显著降低,表明超高压对芽孢萌发产生一定影响,打开芽孢内容物的释放通道,超高压结合化学物质处理都对芽孢内膜造成一定程度的损伤,但是从芽孢存活浓度的结果可以看出,这种损伤是一种亚致死性的机械损伤,无法对芽孢产生杀灭效果。