【摘 要】
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目的:研究缺氧诱导因子（HIF-1α）在新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）中的作用机制。方法:（1）收集8例NEC患儿小肠组织作为疾病组和6例胃肠道畸形患儿小肠组织作为对照组。（2）按照随机数字法,将40只7日龄的C57BL/6新生鼠（WT）分为NEC组（WT/NEC,n=20）和对照组（WT/DF,n=20）,40只7日龄C57BL/6背景的谷氧还原蛋白（Grx1）基因敲除鼠(Grx1-/-)分为
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目的:研究缺氧诱导因子（HIF-1α）在新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）中的作用机制。方法:（1）收集8例NEC患儿小肠组织作为疾病组和6例胃肠道畸形患儿小肠组织作为对照组。（2）按照随机数字法,将40只7日龄的C57BL/6新生鼠（WT）分为NEC组（WT/NEC,n=20）和对照组（WT/DF,n=20）,40只7日龄C57BL/6背景的谷氧还原蛋白（Grx1）基因敲除鼠(Grx1-/-)分为NEC组(Grx1-/-/NEC,n=20)和对照组(Grx1-/-/DF,n=20)。NEC组小鼠给与配方乳人工喂养、缺氧、冷刺激、脂多糖灌胃处理,对照组小鼠与母鼠同室,不做任何处理,建模3日后予以取材。HE染色检测小鼠小肠组织病理学变化;Western blot检测人和小鼠肠组织HIF-1α,小鼠肠组织血管内皮生长因子A（VEGFA）;RT-PCR检测小鼠肠道VEGFA m RNA;免疫荧光染色检测人和小鼠肠组织HIF-1α;血小板内皮细胞粘附分子（CD31）标记小肠血管,免疫荧光染色检测小鼠小肠血管密度。结果:（1）NEC患儿小肠组织中HIF-1α表达量较对照组显著降低（P<0.05）;（2）WT/NEC小鼠小肠组织病理学评分较WT/DF组显著升高（P<0.05）,而Grx1-/-/NEC组小鼠的肠道病理学评分较WT/NEC显著降低（P<0.05）;（3）WT/NEC小鼠小肠组织HIF-1α和VEGFA蛋白表达量较WT/DF显著降低（P<0.05）;（4）WT/NEC组小肠组织中VEGFA表达量较WT/DF组显著降低（P<0.05）,Grx1-/-/NEC组VEGFA表达量较WT/NEC组显著升高（P<0.05）;（5）HIF-1α主要表达于小肠上皮细胞,NEC患儿肠组织和NEC小鼠肠组织中HIF-1α免疫荧光染色强度均较各自对照组显著降低,而Grx1基因敲除显著提高了NEC小鼠肠组织HIF-1α免疫荧光染色强度;（6）WT/NEC小鼠小肠血管密度较WT/DF组显著降低（P<0.05）,而Grx1-/-/NEC组小鼠小肠血管密度较WT/NEC显著升高（P<0.05）。结论:该研究结果表明,HIF-1α在NEC患儿和NEC小鼠中有重要作用,Grx1基因敲除可提高NEC小鼠肠道HIF-1α表达量,促进了下游靶基因VEGFA m RNA表达量,促进了NEC小鼠小肠血管发育,提高了小肠血管密度,减轻了NEC小鼠肠道损伤,从而对NEC起到保护作用。
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