芩苓汤对鸡滑液囊支原体病的治疗作用研究

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鸡滑液囊支原体病是由滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起的,以关节渗出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎为主要特征的疾病。病原可长期定植于呼吸道,当机体免疫力下降时扩散至全身。MS在体外可侵袭成纤维细胞、软骨细胞及血细胞。病鸡表现为关节或足垫肿大、跛行、呼吸道疾病、体型消瘦等,病程后期由于关节变形、长时间卧地不起而无法采食,导致体型极度消瘦,最终因严重衰竭或者并发其他疾病而死。目前鸡场多采用抗生素进行治疗,但使用抗生素会产生耐药性。活疫苗不能保护已感染的鸡群,灭活疫苗不能显著改善感染,使用中药治疗鸡滑液囊支原体病可以在治疗的同时避免产生耐药性,且中草药来源广泛,还能够调控机体的免疫力,具有良好的发展前景。芩苓汤,由黄芩、土茯苓和川牛膝组成,具有清肺燥湿、利水消肿、通利关节的作用,与鸡滑液囊支原体病的湿痹证型相应。因此,本实验探究芩苓汤对鸡滑液囊支原体病的治疗效果以及相关机制,为临床治疗鸡滑液囊支原体病提供新的方法。将自然发病的43只16周龄MS血清抗体为阳性的肉种鸡随机分为3组,分别是对照组(n=14)、芩苓汤组(n=15)和抗生素组(n=14)。其中对照组不治疗;芩苓汤组给药剂量为4 g/kg;抗生素组使用泰乐菌素可溶性粉治疗,给药剂量为0.2 g/kg,每日给药1次,连续给药5天,观察20天。监测体温、体重、跗关节周长,计算周长比,并对临床症状评分。检测各组TNF-α和MS血清抗体水平,计算各组MS血清抗体的阴性率;第25天根据临床症状评分下降的百分比计算各组总有效率及存活率;对每组鸡进行剖检评分;观察病理变化;检测各组气管病原载量。结果显示,治疗前各组各指标均无明显差异。经过5天治疗和20天观察,芩苓汤组体温和关节周长与对照组无显著差异;体重、MS血清抗体阴性率、存活率和总有效率显著高于对照组;周长比、临床症状评分、剖检评分、气管黏膜厚度和气管病原载量显著低于对照组。芩苓汤组关节腔内组织碎片较少;滑膜下组织未见炎性细胞及渗出物。以上结果表明4 g/kg的芩苓汤对鸡滑液囊支原体病有良好的治疗效果,治愈率为53.3%,有效率可达66.7%。为探究芩苓汤治疗鸡滑液囊支原体病的相关机制,进一步研究了芩苓汤及其活性成分:黄芩苷、落新妇苷、阿魏酸和槲皮素等对鸡滑液囊支原体(MS)黏附鸡胚成纤维细胞(DF-1)的作用和炎性因子表达的影响。结果显示,芩苓汤、落新妇苷和槲皮素均能明显减少MS的黏附量。阿魏酸、黄芩苷和槲皮素能够使细胞培养上清中IL-1β浓度显著降低。芩苓汤、阿魏酸、黄芩苷、落新妇苷和槲皮素均能使IL-6 m RNA的相对表达量显著降低。芩苓汤和落新妇苷能够使IL-8 m RNA的相对表达量显著降低。芩苓汤、阿魏酸、黄芩苷和落新妇苷可使TNF-αm RNA相对表达量显著降低。结果表明MS感染DF-1后能够促进IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表达与释放,而芩苓汤能够显著降低IL-6、IL-8和TNF-αm RNA的相对表达量。综上所述,芩苓汤对自然发病的鸡滑液囊支原体病有良好的治疗效果,治愈率为53.3%,有效率可达66.7%。芩苓汤治疗鸡滑液囊支原体病的机制可能与抑制MS的黏附和IL-6、IL-8和TNF-α等炎性因子的表达相关。本研究为中药治疗鸡滑液囊支原体病提供了新的方法和实验依据。
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