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中文摘要目的:从P-选择素介导肿瘤粘连的角度出发,对肿瘤细胞转移的分子机制进行研究,有助于揭示恶性肿瘤扩散转移的奥秘,从而为进一步寻找阻断恶性肿瘤转移的有效方法提供新的思路。方法:通过培养细胞,应用脂质体介导DNA转移法将P-selectin转染到CHO细胞上,然后用新霉素(G418)及氨甲蝶呤(MTX)行药物筛选,流式细胞仪检测,得到高表达P-selectin的CHO细胞系。将其与人口腔癌中最常见的舌鳞状细胞癌细胞行滚动粘附实验(Rolling检测法),在模拟微血管血流的条件下,来测定人舌鳞状细胞癌细胞在固定的P-selectin分子的滚动及结合情况及其与P-selectin粘附的特异性。结果:应用脂质体介导DNA转移法将P-selectin转染到CHO细胞,用G418及MTX行药物筛选,流式细胞仪检测到高表达P-selectin的CHO细胞株。在细胞滚动粘附实验中,人舌鳞状细胞癌细胞Tca8113粘附于P-CHO细胞数目与粘附于CHO 细胞单层上的数目,经统计学处理,二者差异有极显著统计学意义(P<0.001)。用P-selectin粘连阻断单抗、多抗处理后,每个视野中CHO 细胞单层与Tca8113细胞粘附的数目较处理前均无显著性差异(P>0.05);而处理后的P-CHO细胞与Tca8113细胞粘附数目较处理前均明显减少(P<0.001);应用mAbPS1(非阻断性多抗)处理后人舌鳞状细胞癌细胞Tca8113粘附于P-CHO细胞数目与粘附于CHO 细胞单层上的数目较处理前均无显著性差异(P>0.05)。结论:1.应用细胞培养研究肿瘤生长、浸润及转移机制较体内实验具有显著的优势。2. 流式细胞仪是检测P-selectin质粒转染表达率、结合率的最精确、方便的方法之一。<WP=4>3.应用脂质体介导DNA转移法加G418及MTX药物筛选转染CHO细胞,能得到高表达P-selectin的CHO细胞系。4.人舌鳞状细胞癌细胞和P-selectin的粘附是特异的,并对P-selectin粘附有明显的依赖性。说明P-selectin介导人舌鳞状细胞癌的转移,进而说明P-selectin在人口腔恶性肿瘤转移中起重要作用,从而为进一步寻找阻断该粘附过程的有效方法及控制肿瘤的转移有着十分重要的意义。