马铃薯脱毒试管苗的生物反应器培养及微环境调控

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马铃薯以营养繁殖为主,为了克服栽培中出现的马铃薯因病毒病产生的退化现象,现今主要运用马铃薯茎尖脱毒的方法培养试管苗进行马铃薯种薯生产。随着马铃薯种植面积的扩大,对马铃薯试管苗数量的需求越来越大,但常规组培操作繁琐,效率低,成本高。为弥补传统培养方法的缺陷,本研究利用5L气升式生物反应器作为培养容器,以马铃薯“延薯4号”脱毒试管苗为试验材料,首先采用浸没式、间歇浸没式、接触式三种方式培养试管苗,拟筛选出适合于试管苗生长的培养方式;其次,拟通过对生物反应器内不同培养基浓度、培养基内不同铵态氮与硝态氮浓度比的设置,拟探明适于马铃薯试管苗生长的最佳浓度。研究结果如下:1.不同的培养方式对试管苗生长有显著影响,浸没式培养中试管苗的鲜重、干重、叶片大小显著高于其它培养方式;2.不同的培养基浓度对试管苗生长的影响具有显著差异,其中马铃薯试管苗在1/4、1/2MS培养基浓度的处理中不能正常生长,在1、3/2、2MS培养基浓度处理中试管苗均能正常生长,且在培养基浓度为2 MS的处理中,试管苗具有最佳生长状态和最大生物量;3.不同的铵态氮与硝态氮浓度比对试管苗的影响不同,铵态氮和硝态氮浓度为20:100 mmol·L-1时,试管苗生长状态最好,生物量、株高都显著高于其他处理,浓度为80:40 mmol·L-1和100:20 mmol·L-1两个处理中的试管苗都无法正常生长,说明高浓度硝态氮适宜试管苗生长,铵态氮含量过高抑制试管苗的生长。综合以上研究结果,马铃薯试管苗完全浸没式生物反应器培养效果最好;培养基浓度为2 MS(Murashige and Skoog,总氮量120 mmol · L-1),其中铵态氮与硝态氮浓度比为20:100 mmol·L-1是马铃薯试管苗的最佳培养条件。
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