木质纤维素底物中的纤维素可通过纤维素酶酶解转化为可发酵糖,进而通过发酵生产纤维素乙醇。酶解成本偏高制约了纤维素乙醇的发展,实现纤维素酶的多酶协同增效是降低酶解成本的重要方法。针对β-葡萄糖苷酶等电点偏高和纤维二糖底物溶于水的特点,本文提出对β-葡萄糖苷酶进行亲木质素改性,即在其表面接枝阳离子基团,通过增强其与木质素间的静电作用力使其优先吸附在木质素上,构建β-葡萄糖苷酶/木质素非均相酶解纤维二糖体系,在保持β-葡萄糖苷酶高催化活力的同时减少木质素对纤维素内切酶和外切酶的无效吸附,从而实现酶解过程的强化。首先,利用乙二胺对β-葡萄糖苷酶的羧基进行酰胺化改性,增加β-葡萄糖苷酶在木质素上的吸附量,提高对木质纤维素的酶解效率。研究了活化剂（EDC/NHS）和乙二胺用量对改性β-葡萄糖苷酶酶活和分子量的影响规律,发现β-葡萄糖苷酶、EDC与NHS的摩尔比为1:20:30时,能够较好地活化乙二胺接枝反应;当酶与乙二胺摩尔比低于1:20时,交联副反应较少,β-葡萄糖苷酶的酶活保留率大于74%。在木质素上吸附后形成非均相体系,可使乙二胺改性β-葡萄糖苷酶的酶活提高12.1%。进一步研究了乙二胺用量对酶解性能的影响,结果表明,随着乙二胺用量的增加,对木质纤维素的酶解性能先升高后降低。随着酶解体系p H的降低,乙二胺改性β-葡萄糖苷酶的酶解性能增强。当p H=4.0时,可使玉米芯72 h酶解效率提高15.5%,而p H=4.8时仅提高10%。QCM测试表明,乙二胺改性β-葡萄糖苷酶可通过竞争吸附减少内切酶和外切酶等在木质素上的无效吸附,促进木质纤维素酶解,初步验证了β-葡萄糖苷酶亲木质素改性强化酶解的有效性。为了进一步增加可阳离子化基团的接枝量并减少其对酶活的影响,模仿外切酶“催化域-连接肽-结合域”的结构,设计合成了丙烯酰胺-甲基丙烯酸二甲胺乙酯嵌段聚合物改性β-葡萄糖苷酶。将嵌段聚合物与纤维素酶复合后用于木质纤维素底物的酶解,在相同浓度下随着聚合物中阳离子嵌段比例的增加,酶解效率先升高后降低。当聚合物中丙烯酰胺与甲基丙烯酸二甲胺乙酯的摩尔比为80:30时,酶解强化效果最优,可将玉米芯的72 h酶解效率提高45.8%。将嵌段聚合物接枝到β-葡萄糖苷酶后,酶的p H稳定性提高,在p H=3.0和6.0时的酶活比改性前分别提高了9.1%和27.7%,在p H=4.8的缓冲体系中168 h后的酶活保留率均大于84.5%。添加15 CBU/g葡聚糖的嵌段聚合物改性β-葡萄糖苷酶可使玉米芯72 h的酶解效率提高7.5%。QCM测试表明嵌段聚合物可将纤维素酶在木质素上的无效吸附减少21%,从而提高木质纤维素的酶解效率。但由于β-葡萄糖苷酶的分子量较大,嵌段聚合物接枝于酶表面后其整体吸附驱动力减弱,难以减少木质素对内切酶和外切酶的无效吸附,对木质纤维素的酶解影响较小。本文通过接枝乙二胺实现β-葡萄糖苷酶的亲木质素改性减少纤维素酶的无效吸附从而提高木质纤维素的酶解效率,通过接枝多胺基嵌段聚合物提高了β-葡萄糖苷酶的稳定性,可为酶解技术的改进、纤维素酶的菌株改造提供新的思路和指导。