【摘 要】
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背景:蛛网膜下腔出血（Subarachnoid Hemorrhage,SAH）严重危及生命财产安全,治疗难度大,是目前研究热点。目的:探讨在大鼠SAH模型中应用RNA干扰技术验证在SAH早期脑损伤（Early brain injury,EBI）中降钙素相关基因肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）低表达对炎症反应的影响。方法:随机选取成年SD大鼠25只,分成
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背景:蛛网膜下腔出血（Subarachnoid Hemorrhage,SAH）严重危及生命财产安全,治疗难度大,是目前研究热点。目的:探讨在大鼠SAH模型中应用RNA干扰技术验证在SAH早期脑损伤（Early brain injury,EBI）中降钙素相关基因肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）低表达对炎症反应的影响。方法:随机选取成年SD大鼠25只,分成5组,每组5只,分别是:CGRP-si RNA+SAH组（n=5）、Vehicle+SAH组、SCR-si RNA+SAH组（n=5）、SAH组（n=5）、sham（n=5）组。在CGRP-si RNA+SAH组中,应用筛选出的CGRP-si RNA与Entranster TM-in vivo转染试剂形成混合后进行大鼠侧脑室注射给药。SCR+SAH组以同样的比例和剂量行侧脑室穿刺给药,SAH组给予同等剂量的生理盐水,假手术组切开皮肤、磨钻钻孔后不做任何处理。连续3天侧脑室给药后,应用优化的视交叉池前注血法建立SD大鼠SAH模型。造模成功后24小时对所有大鼠进行神经功能评分,然后将大鼠麻醉后,用注射器抽取大鼠脑脊液0.1ml,通过ELISA试剂盒检测CGRP含量。然后处死后取全脑,分离出右侧海马,研磨后取上清,通过大鼠白介素-1β（IL-1β）和大鼠肿瘤坏死因子（TNF-α）ELISA试剂盒检测IL-1β、TNF-α表达水平,作为炎症反应水平的高低。结果:SAH组、Scr+SAH组、Vehicle+SAH组、CGRP-si RNA+SAH组与Sham组相比,CGRP升高（P<0.05）。CGRP-si RNA+SAH组与SAH组、Scr+SAH组、Vehicle+SAH组相比,CGRP降低（p<0.05）。SAH组、Scr+SAH组和Vehicle+SAH组间对比,CGRP无显著差异（P>0.05）。SAH组、CGRP-si RNA+SAH组、Scr+SAH组、Vehicle+SAH组与Sham组相比,TNF-α、神经功能评分、IL-1β升高（P<0.05）。CGRP-si RNA组与SAH组、Scr+SAH组、Vehicle+SAH组比,TNF-α、神经功能评分、IL-1β仍升高（P<0.05）。SAH组、Scr+SAH组和Vehicle+SAH组间对比,TNF-α、神经功能评分、IL-1β无显著差异（P>0.05）。结论:1、蛛网膜下腔出血的动物模型中,发现早期脑损伤中CGRP含量以及海马组织中IL-1β、TNF-α升高。2、通过分组实验发现抑制CGRP的表达后,可见SAH后海马组织中IL-1β、TNF-α进一步升高,进而加重早期脑损伤。3、CGRP在SAH具有一定的抑制炎症反应从而保护脑功能的作用。4、本实验中CGRP低表达,能明显增加SAH后海马组织中IL-1β、TNF-α的表达,这为下一步研究CGRP如何调节炎症反应的病理损伤机制提供了实验基础。
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