滨海湿地放线菌的分离及抗菌活性菌株和功能基因的筛选

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woshishaoqiaolin
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放线菌是开发天然药用活性化合物的资源宝库,在微生物新药研究中占据着非常重要的地位。海洋放线菌由于其特殊的生态环境,可能具有与陆地放线菌不同的代谢途径,具有新型良好活性代谢产物的合成潜力,是抗生素开发的潜在资源。天然来源的抗生素中很多是由放线菌产生的,而链霉菌属的放线菌因其能够产生具有良好生物活性的次级代谢产物而在制药工业中被广泛使用。由于病原体的快速变异和耐药性的出现,对新型抗生素的需求也持续增长。虽然在化学生物合成领域已经取得相当大的进展,但自然界仍然是新型抗生素最丰富的来源。放线菌存在于各种生态系统中,在土壤中特别丰富,在淡水和海洋环境中也比较丰富。未经开发的生境中的放线菌被认为是新颖的生物活性天然产物的潜在来源。本研究旨在从滨海湿地的底泥中分离具有良好抗菌活性的放线菌,为新型天然产物的开发与利用奠定基础。本研究采用纯培养法对山东省威海市桑沟湾湿地和天鹅湖湿地底泥样品中的放线菌进行分离,并通过纸片法检测分离到的放线菌发酵产物粗提物对7种指示菌的抗菌活性,选取抗菌活性较好的菌株进行聚酮合酶(Polyketide synthase,PKS)和非核糖体肽合成酶(Non-ribosomal peptide synthetase,NRPS)基因的筛选。从两个地点的湿地底泥样品中共分离到放线菌109株,其中桑沟湾湿地得到49株,天鹅湖湿地得到60株。在对109株放线菌菌株的抗菌活性筛选中,104株放线菌至少对1种指示菌具有抑制作用,23株放线菌对2种指示菌具有抑制作用,19株放线菌对3种指示菌具有抑制作用,18株放线菌对4种指示菌具有抑制作用,7株放线菌对5种指示菌具有抑制作用。对抗菌活性较好的35株放线菌菌株的PKS和NRPS基因筛选中,7株具有PKS基因,9株具有NRPS基因,3株(TEHA31、SGWA09和SGWA47)同时具有PKS和NRPS基因。研究结果表明,滨海湿地来源的放线菌具有良好的抗菌活性,且菌株中具有较为新颖的PKS或NRPS基因,具有合成新的次级代谢产物的能力。
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