绿萝根际微生物中甲醛降解菌的筛选、驯化及其与植物联用

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植物根际被认为是存在大量微生物和地球上最具活力的区域之一。从植物根际筛选一种高效、稳定、安全的甲醛降解菌,并尝试将微生物与植物系统联用处理空气中甲醛,是一种高效、经济且环保的方法。本研究从盆栽绿萝的根际微生物群落中分离甲醛高效降解菌,并通过驯化以及培养环境优化来提升菌种降解甲醛能力。最后探讨将筛选出的菌种与宿主植物联用来降解空气中的甲醛的效果。实验结果表明:在盆栽绿萝的根际微生物群落中,成功分离了一株甲醛高效降解菌LL3-1(革兰氏阳性,兼性好氧菌),扫描电镜观测为,杆状,不透明,直径在712.8 nm~1.146μm之间,宽度在199.4 nm~495.5 nm之间。经16S r DNA鉴定为植物内生赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus endophyticus)(Gen Bank编号MN784374)。通过单因素和正交实验确定了3种主要因素对菌株降解甲醛的影响大小顺序为:p H值>温度>转速;通过响应面Box-Behnken设计实验,得到最优的培养条件:p H值为7.0,温度为35℃,转速为150 r/min,在此条件下菌株6 h内可完全降解500 mg/L的甲醛溶液。不同甲醛浓度对菌株生长量及降解速率的影响研究结果表明:菌株LL3-1的生长量随着甲醛浓度增加而增加,生长延迟期也随着延长,随着甲醛浓度的降解,碳源的消耗,菌株生长受到抑制。当甲醛初始浓度为200 mg/L时,该菌株将甲醛完全降解只需3 h;初始浓度为≤600 mg/L时,菌株可在6 h之内将其全部降解;初始浓度为1200 mg/L时,菌株可在20 h内降解完。通过对菌株生长及降解动力学的研究,结果表明:菌株LL3-1的生长及降解动力学分别符合Andrew模型和Haldane模型,经拟合生长动力学最大比生长速率μmax=1.0754 h-1,底物半饱和常数Ks=45.5410 mg/L,抑制常数Ksi=117.5512 mg/L,R~2=0.9644;甲醛降解动力学最大比降解速率vm=0.5588 h-1,底物半饱和常数Ks=31.3345 mg/L,抑制常数Ksl=204.9726 mg/L,R~2=0.9746。最后,将LL3-1喷洒在植物叶面上,并将整盆植物放入动态熏蒸系统进行甲醛熏蒸实验。实验结果表明:在24 h内绿萝、吊兰、虎皮兰甲醛净化能力日间分别提高了33.1%±1.28%、27.8%±2.03%、12.83%±0.76%,夜间分别提高了12.17%±2.25%、16.67%±2.52%、11.77%±1.25%。对喷洒菌株的绿萝持续熏蒸72 h,由于喷洒的菌株有效期较短,菌株未能长时间持续性的提高绿萝去除甲醛能力,绿萝仅依靠自身能力净化甲醛,并能维持相对的稳定性。
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