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目的:研究大黄素对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞ABCG1蛋白的表达的影响及NF-κB、TNF-α、IL-1β表达的影响,完善大黄素抗AS的作用机制。
方法:1.使用ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞转变为泡沫细胞。分为大黄素高、中、低剂量组处理巨噬细胞源性泡沫细胞,ELISA法检测ABCG1水平。2.使用ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞转变为泡沫细胞。分成8组:大黄素高、中、低剂量组、激动剂组、阻断剂组、阳性对照组、中剂量+阻断剂组、空白组。采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β,Western Blot法检测NF-κB,Real-time PCR法检测NF-κB、TNF-α、IL-1β。
结果:ELISA法检测ABCG1、TNF-α、IL-1β,结果显示:与空白组相比,大黄素各剂量组均能升高ABCG1蛋白的表达(P<0.01),大黄素高剂量组升高程度优于大黄素中、低剂量组(P<0.01)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低TNF-α蛋白的表达(P<0.01),大黄素高剂量组降低程度优于大黄素中、低剂量组(P<0.01)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低IL-1β蛋白的表达(P<0.05),大黄素各剂量之间无明显差异(P>0.05)。Western Blot法检测NF-κB,结果显示:与空白组相比,大黄素高、中、低剂量组能降低NF-κB蛋白的表达。Real-time PCR法检测NF-κB、TNF-α、IL-1β,结果显示:与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低NF-κB mRNA的表达(P<0.01),大黄素各剂量之间无明显差异(P>0.05)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低TNF-αmRNA的表达(P<0.05),大黄素高剂量组降低程度优于大黄素中、低剂量组(P<0.05)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能提升IL-1βmRNA的表达(P<0.01),大黄素各剂量组之间相比存在明显差异(P<0.01),且以大黄素低剂量组提升最明显。
结论:大黄素可上调ABCG1蛋白的表达,通过NF-κB信号转导途径调节NF-κB、TNF-α、IL-1β水平,从而降低泡沫细胞内相关炎性因子含量,具有一定的抗AS作用。
方法:1.使用ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞转变为泡沫细胞。分为大黄素高、中、低剂量组处理巨噬细胞源性泡沫细胞,ELISA法检测ABCG1水平。2.使用ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞转变为泡沫细胞。分成8组:大黄素高、中、低剂量组、激动剂组、阻断剂组、阳性对照组、中剂量+阻断剂组、空白组。采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β,Western Blot法检测NF-κB,Real-time PCR法检测NF-κB、TNF-α、IL-1β。
结果:ELISA法检测ABCG1、TNF-α、IL-1β,结果显示:与空白组相比,大黄素各剂量组均能升高ABCG1蛋白的表达(P<0.01),大黄素高剂量组升高程度优于大黄素中、低剂量组(P<0.01)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低TNF-α蛋白的表达(P<0.01),大黄素高剂量组降低程度优于大黄素中、低剂量组(P<0.01)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低IL-1β蛋白的表达(P<0.05),大黄素各剂量之间无明显差异(P>0.05)。Western Blot法检测NF-κB,结果显示:与空白组相比,大黄素高、中、低剂量组能降低NF-κB蛋白的表达。Real-time PCR法检测NF-κB、TNF-α、IL-1β,结果显示:与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低NF-κB mRNA的表达(P<0.01),大黄素各剂量之间无明显差异(P>0.05)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能降低TNF-αmRNA的表达(P<0.05),大黄素高剂量组降低程度优于大黄素中、低剂量组(P<0.05)。与空白组相比,大黄素各剂量组均能提升IL-1βmRNA的表达(P<0.01),大黄素各剂量组之间相比存在明显差异(P<0.01),且以大黄素低剂量组提升最明显。
结论:大黄素可上调ABCG1蛋白的表达,通过NF-κB信号转导途径调节NF-κB、TNF-α、IL-1β水平,从而降低泡沫细胞内相关炎性因子含量,具有一定的抗AS作用。