【摘 要】
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李斯特菌分拣酶A(SrtA)可以影响其表面蛋白的锚定,从而影响李斯特菌的毒力。本研究利用PCR技术扩增临床分离到的4b血清型的李斯特菌野毒株LM90SB2的srtA基因,测序并进行序列的比对分析后,将其克隆到原核表达质粒pET32a中构成重组表达质粒pET32a-srtA,转化入BL21 (DE3)中,IPTG诱导使其表达,SDS-PAGE电泳检测,同时采用Western blotting对表达产
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,石河子 832003
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第十一次全国学术研讨会暨第五届会员代表大会
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李斯特菌分拣酶A(SrtA)可以影响其表面蛋白的锚定,从而影响李斯特菌的毒力。本研究利用PCR技术扩增临床分离到的4b血清型的李斯特菌野毒株LM90SB2的srtA基因,测序并进行序列的比对分析后,将其克隆到原核表达质粒pET32a中构成重组表达质粒pET32a-srtA,转化入BL21 (DE3)中,IPTG诱导使其表达,SDS-PAGE电泳检测,同时采用Western blotting对表达产物进行了鉴定。结果表明：SrtA蛋白在BL21 (DE3)中大量表达,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western blotting检测分析其为一个分子量为36kD的融合蛋白与预期的大小相符合。成功的构建了重组质粒pET32a-srtA,并使其在BL21 (DE3)中获得了高效的表达,为下一步制备特异单抗奠定了基础。
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从病原学和病理学角度对阜新某个体养鸡场12日龄仔鸡急性死亡的病因进行研究分析。病原学检查结果表明，从病死鸡的嗉囊刮取物做病原菌培养并分离，并利用培养的单个菌落制成涂片看到：该菌革兰氏染色阳性、酵母菌样的菌体和假菌丝，形状呈卵圆形，个体较大较清楚，酷似瓜子状。之后通过细菌分离培养、形态学检验、生化鉴定、药敏实验等对该病原菌进行鉴定，其培养特性和生化特性与鸡念珠菌相似，初步证实该病原菌为鸡念珠菌；药敏
本研究收集2007 ～ 2013年间福建省及邻近省份的疑似禽霍乱病死亡鸡、鸭、鹅,进行细菌分离,PCR进行种和荚膜群的鉴定,琼脂扩散试验鉴定其Heddleston氏耐热茵体抗原型.结果共分离鉴定多杀性巴氏杆菌95株,其中鸭源74株,鸡源17株,鹅源4株.其荚膜群全为A型,1型耐热茵体抗原型占67.4％.与20世纪80年代以来我国已有的报道相同,禽源(不含火鸡)多杀性巴氏杆菌血清型仍然以A：1为主.
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